多孔丝素蛋白支架修复兔下颌骨临界性骨缺损的实验研究

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目的本实验旨在通过观察多孔丝素蛋白支架对兔下颌骨临界性骨缺损的修复情况,初步研究单纯丝素支架原位修复骨缺损的能力,了解单纯多孔丝素蛋白支架是否可以应用于骨原位组织工程中。材料与方法1、制备多孔丝素蛋白支架,平均孔径190±15μm,平均孔隙率96.6±0.1%,扫描电镜观察其表面及其内部的结构。2、制作临界性骨缺损模型:选用体重相当的新西兰大白兔,全麻下在其双侧下颌骨体用耳科高速电钻磨出直径约0.8cm的全层骨缺损。3、将造模后的家兔随机分成两组,即实验组和对照组,实验组骨缺损处植入多孔丝素蛋白支架,对照组不做处理。4、术后选取2、6、12周三个观测时间点,取材进行大体观察、X线摄片、骨密度测定、组织病理切片HE染色和BMP-2免疫组化染色。5、所得数据均用SPSS14.0软件进行统计分析。结果1、大体标本观察可见,实验组和对照组家兔术区均无感染和继发性骨折。实验组骨缺损腔缩小,材料无脱出;对照组骨缺损腔内充满肉芽组织;2、X线摄片和骨密度测定:随着术后时间的延长,实验组和对照组骨密度均有增高,且12周>6周>2周,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组新生骨面积和骨密度均高于对照组(P<0.05);在观察时间内,两组的骨缺损均未达到完全愈合,多孔丝素蛋白支架未完全降解。3、组织病理切片HE染色:术后2周,实验组宿主骨断端与材料结合紧密,骨缺损断端向支架内部嵌入,材料内部可见新生血管,未见明显新生骨形成;对照组宿主骨断端可见骨质少量吸收,缺损腔内充满大量纤维结缔组织,未见明显新生骨组织;术后6周,实验组可见宿主骨断端与材料界面不清,可见大量岛状新生骨组织及新生血管,有成片的骨小梁形成;对照组宿主骨断端清晰可见,有少量新生骨组织形成,无明显骨小梁形成;术后12周,实验组岛状新生骨及骨小梁明显增多,而且粗大而致密,融合成片,新生血管略有减少。材料内部明显疏松,部分区域孔径增大,部分区域塌陷;对照组宿主骨边缘可见散在分布的新生骨组织,但并无粗大的骨小梁形成。4、BMP-2免疫组化染色:实验组和对照组术后新生骨小梁中BMP-2阳性的细胞数随时间的延长均有不同程度的增加,且12周>6周>2周,差异具有统计学意义(p<0.05);各时间点实验组的BMP阳性细胞数均高于对照组,差异具有统计学意义(p<0.05)。结论单纯多孔丝素蛋白支架具有良好的生物相容性,并可以促进新骨再生;平均孔隙为190±15μm,平均孔隙率为96.6±0.1%的多孔丝素蛋白支架用于原位组织工程修复骨缺损具有一定可行性;植入于骨组织后三个月内,丝素蛋白未完全降解。
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