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背景和目的:免疫抑制受体LILRB4主要表达在正常单核细胞、巨噬细胞以及部分抗原递呈细胞表面,我们前期研究结果表明:LILRB4可以作为急性髓系白血病(AML)M4和M5亚型的诊断标记物,通过apoE/LILRB4/SHP2/NF-κB/uPAR/Arginase-1信号通路产生免疫抑制微环境,介导T细胞的增殖抑制和AML细胞的髓外器官浸润;抗体封闭LILRB4信号通路,能够显著抑制AML的发展。LILRB4是否在实体瘤中表达,未见报道。因此,本研究的主要目的是揭示LILRB4在实体瘤中的表达模式、分析LILRB4的表达与各病理指标的相关性,阐明LILRB4在实体瘤中的功能。方法:本研究应用免疫组化和流式细胞仪分别检测了 LILRB4在多发性骨髓瘤、前列腺癌、肝癌、黑色素瘤、乳腺癌、脑肿瘤、头颈部鳞癌、甲状腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、子宫内膜癌以及食管癌组织和细胞株中的表达;应用表达强弱与表达面积的乘积将LILRB4的表达分为强(200-300分)、中(100-200分)、弱(1-100分)以及阴性表达(0分)四个等级;SPSS软件分析LILRB4的表达与各病理指标的相关性。应用CRISPR-CAS9敲掉LILRB4在RPM-8226细胞株中的表达,应用细胞-细胞相互接触以及Transwell相隔离的方式进行T细胞共培养,流式细胞仪检测CFSE的稀释倍数代表T细胞的增殖结果:TCGA数据库查询结果表明:LILRB4在乳腺癌、食管癌、头颈部鳞癌、肾癌、前列腺癌、胃癌、肝癌、结肠癌和子宫内膜癌中的表达比正常组织要高;Protein Atlas数据库结果表明:LILRB4在结肠癌、肝癌、黑色素瘤以及肾癌中有表达。本课题组免疫组化结果表明:LILRB4主要表达在细胞膜和细胞浆中,在细胞核中未发现LILRB4的表达;其中在多发性骨髓瘤、乳腺癌、前列腺癌、肝细胞癌以及黑色素瘤中检测到LILRB4的表达,其阳性表达率分别为:40%(4/10)、36.67%(33/90)、16.67%(8/48)、29%(28/95)、19.5%(16/82),在胃癌、甲状腺癌、肺癌、结肠癌、胰腺癌、头颈部鳞癌、脑肿瘤、子宫内膜癌以及食管癌中未检测到LILRB4的表达;Pearson相关分析表明LILRB4与乳腺癌的分级有相关性,与其他的任何肿瘤的临床分期、病理分期无明显的相关性;在肿瘤细胞株中,LILRB4在多发性骨髓瘤细胞株RPM-8226、KMS26、OPM2、RPM1和U266细胞中,检测到LILRB4的表达;而在乳腺癌细胞株(SK-BR-3,MDA-MB-231,T47D,MCF7)、前列腺癌细胞株(PC-3、DU-145、LnCap)、黑色素瘤细胞株(SK-MEL-1,SK-MEL-2,SK-MEL-5,OCM1,OCM3,OCMM1,A375,M14,UACC257,UACC62,MDA-MB-435,MALEM-3M)、肝癌细胞株(HUH7、HePG2)、肺癌细胞株(A549,H1299,H292)以及结肠癌细胞株(CACO2,SW620,SW480,HCT116)未检测到 LILRB4 的表达。CRISPR-CAS9 系统敲掉 LILRB4 在RPM-8226细胞株中的表达,通过细胞-细胞相接触以及Transwell相隔离的T细胞共培养系统,发现LILRB4-KO能够显著逆转LILRB4-WT介导的T细胞增殖抑制。结论:免疫抑制受体LILRB4除表达在正常单核/巨噬细胞以及AML细胞之外,在多发性骨髓瘤、前列腺癌、肝细胞癌、黑色素瘤以及乳腺肿瘤也有表达,敲掉LILRB4的表达,能够恢复CD3+T细胞的增殖。