系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)是一种多系统受累的自身免疫性疾病,遗传和环境在其发病过程中均起重要作用。本研究采用病例对照研究及单纯病例研究设计,运用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)-限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism, RFLP)等分子生物学技术,在中国长江以南汉族女性人群中研究甲基CpG结合蛋白2基因(Methyl-CpG-binding protein-2, MECP2)、5,10-亚甲基四氧叶酸还原酶(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR)基因多态性以及基因-基因、基因-环境交互作用与SLE易感性关系,并进一步研究MECP2基因及MTHFR基因多态性与SLE临床表型间的相关性。结果如下：一、基因单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮的关联研究1、单因素logistic回归结果显因示,在相加遗传模式下,MTHFR基因rs2239464位点基因型分布在病例对照间的差异有统计学意义(x2=6.060,P=0.014),以AA基因型为参照,携带AG基因型的个体其患SLE的风险性下降(OR=0.531,95%CI：0.321-0.879)；显性遗传模式下,病例对照间rs2239464基因型分布差异有统计学意义(x2=6.198,P=0.013),以AA基因型为参照,携带AG/GG基因型的个体其患SLE的风险性下降(OR=0.511,95%CI：0.301-0.867)；病例对照间rs2239464位点等位基因分布差异也有统计学意义(x2=5.515,P=0.019),以A等位基因为参照,G等位基因可能降低SLE的风险性(OR=0.565,95%CI：0.351-0.910)。2、单因素logistic回归结果显示,在相加遗传模式下,病例组与对照组MECP2基因rs2075596位点基因型分布差异有统计学意义(x2=10.472,P=0.001),以AA基因型为参照,携带AG基因型的个体其患SLE的风险性下降(OR=0.446,95%CI：0.274-0.728)；显性遗传模式下,病例对照间rs2075596基因型分布差异有统计学意义(x2=10.114,P=0.001),以AA基因型为参照,携带AG/GG基因型的个体其患SLE的风险性下降(OR=0.430,95%CI：0.256-0.724)；病例对照间rs2075596位点等位基因分布差异也有统计学意义(x2=9.773,P=0.002),以A等位基因为参照,携带G等位基因的个体其患SLE的风险性下降(OR=0.479,95%CI：0.302-0.760)。3、单因素logistic回归结果显示,在相加遗传模式下,病例组与对照组MTHFR基因A1298C位点基因型分布差异有统计学意义(x2=7.608,P=0.006),以AA基因型为参照,携带AC基因型的个体其患SLE的风险性增加(OR=1.819,95%CI：1.189-2.782)：显性遗传模式下,病例对照间A1298C位点基因型分布差异有统计学意义(x2=7.464,P=0.006),以AA基因型为参照,携带AC/CC基因型的个体其患SLE的风险性增加(OR=2.005,95%CI：1.217-3.303)；A1298C等位基因在病例对照间的分布差异也有统计学意义(x2=7.967,P=0.005),以A等位基因为参照,携带C等位基因的个体其患SLE的风险性增加(OR=1.839,95%CI：1.205-2.808)。4、单因素logistic回归结果显示,MTHFR基因C677T位点及G1793A位点基因型和等位基因分布在病例对照间均未发现有统计学意义的差异(P>0.05)。5、多因素logistic回归分析结果显示,调整年龄、冻疮史、环境潮湿史、紫外线暴露史的影响后,在相加及显性遗传模式下,MECP2基因rs2075596位点基因多态性与SLE存在相关性,以AA基因型为参照,具有AG基因型(OR=0.448,95%CI：0.267-0.892)及AG/GG基因型(OR=0.447,95%CI：0.237-0.843)的个体其SLE的发病风险下降。6、多因素logistic回归分析结果显示,调整年龄、冻疮史、环境潮湿史、紫外线暴露史的影响后,在相加及显性遗传模式下,MTHFR基因A1298C位点基因多态性与SLE存在相关性,以AA基因型为参照,具有AC基因型(OR=1.933,95%CI：1.154-3.238)及具有AC/CC基因型(OR=2.119,95%CI：1.135-3.957)的个体其SLE的发病风险增加。7、多因素logistic回归分析结果显示,调整年龄、冻疮史、环境潮湿史、紫外线暴露史的影响后,在相加、显性及隐性遗传模式下,均未发现MECP2基因rs2239464及MTHFR基因C677T、G1793A位点多态性与SLE存在相关性(P>0.05)。二、基因单倍型与系统性红斑狼疮的关联研究1、连锁不平衡分析结果显示,MECP2基因rs2239464与rs2075596位点之间D’值为0.721,r2为0.455；MTHFR基因C677T与A1298C位点、C677T与G1793A位点及A1298C与G1793A位点间D’值分别为0.936、1.000和0.875,r2分别为0.146、0.072和0.330。经检验,MECP2基因两位点间呈连锁不平衡(x2=189.579,P<0.01), MTHFR基因三个位·点间也两两呈连锁不平衡(x2分别为52.056、23.268、96.041,P值均小于0.01)。2、单倍型分析结果显示,在相加及隐性遗传模式下,以不具有A-A单倍型为参照,由MECP2基因rs2239464及rs2075596位点构成的A-A单倍型能增加个体患SLE的风险性(相加：P=0.001,OR=3.139；隐性：P=0.003,OR=2.075)。此时,根据AIC值最小原则,相加遗传模式为最优遗传模式。3、单倍型分析结果显示,在相加及显性遗传模式下,以不具有C-C-G单倍型为参照,山MTHFR基因C677T位点、A1298C位点及G1793A位点构成的C-C-G单倍型能增加个体患SLE的风险性(相加：P=0.020,OR=2.482；显性：P=0.017,OR=2.088)。在隐性遗传模式下,以不具有C-A-G单倍型为参照,由MTHFR基因C677T位点、A1298C位点及G1793A位点构成的C-A-G单倍型能减少个体患SLE的风险性(P=0.037,OR=0.514)。根据AIC值最小原则,相加遗传模式为最优遗传模式。4、采用HAPSTAT3.1软件,在相加、显性及隐性遗传模式下探讨单倍型-单倍型及单倍型-环境因素交互作用。结果显示,在三种遗传模式下均未发现有统计学意义的单倍型-单倍型或单倍型-环境交互作用。三、系统性红斑狼疮的基因-基因、基因-环境交互作用研究1、采用对数线性模型,在相加、显性及隐性遗传模式下进行MECP2基因位点(rs2239464或rs2075596)、MTHFR基因位点(C677T、A1298C或G1793A)及环境因素间基因-基因及基因-环境交互作用研究。结果显示,在三种遗传模式下均未发现存在有统计学意义的基因-基因或基因-环境交互作用。2、采用logistic回归模型,在相加、显性及隐性遗传模式下进行MECP2基因位点(rs2239464或rs2075596)、MTHFR基因位点(C677T、A1298C或G1793A)或环境危险因素(冻疮史、居住环境潮湿史或紫外线暴露史)及基因-基因及基因-环境交互作用研究。结果显示,在显性遗传模式下,G1793A位点AG/AA基因型与紫外线暴露史间存在交互作用(β-1.802,P=0.030)。未发现存在其他基因-基因或基因-环境交互作用。四、基因多态性与系统性红斑狼疮临床表型的相关性研究1、x2检验结果显示,MECP2基因rs2239464位点基因多态性与SLE患者肾脏损害及血液系统异常间存在相关性。以AA基因型或A等位基因为参照,存在肾脏损害患者中rs2239464位点AG/GG基因型的频率(P=0.014,OR=0.386,95%CI.0.179-0.832)或G等位基因的频率(P=0.006,OR=0.387,95%CI.0.193-0.775)均下降。以A等位基因为参照,存在血液系统异常者中rs2239464位点G等位基因的频率也下降(P=0.049,OR=0.463,95%CI：0.215-0.996)。末发现rs2239-464位点基因多态性与其他器官损害间存在相关性,也未发现rs2075596位点基因多态性与器官损害间存在相关性。2、x2检验结果显示,MECP2基因rs2239464位点基因多态性及rs2075596位点基因多态性与SLE患者抗RNP抗体生成存在相关性。以AA基因型或A等位基因为参照,抗RNP抗体阳性患者rs2239464位点AG/GG基因型的频率(P=0.034,OR=2.590,95%CI.1.054-6.367)或G等位基因的频率(P=0.011,OR=2.560,95%CI：1.215-5.393)增加；以AA基闪型或A等位基因为参照,抗RNP抗体阳性患者rs2075596位点AG/GG基因型的频率(P=0.038,OR=2.583,95%CI：1.032-6.465)或G等位基因(P=0.011,OR=2.640,95%CI：1.222-5.703)的频率也增加；未发现rs2239464位点及rs2075596位点基因多态性与其他免疫学指标间存在相关性。3、x2检验结果显示,MTHFR基因A1298C位点基因多态性与SLE患者发生皮肤黏膜损害间存在相关性。以AA基因型或A等位基因为参照,存在皮肤黏膜损害的SLE患者中AC/CC基因型(P=0.043,OR=4.378,95%CI：1.051-18.240)或C等位基因(P=0.044,OR=4.067,95%CI：1.041-15.890)的频率增加。未发现MTHFR基因A1298C位点基因多态性与其他器官损害间存在相关性。也未发现MTHFR基因C677T位点及G1793A位点基因多态性与器官损害间存在相关性。4、x2检验结果显示,MTHFR基因A1298C位点及G1793A位点基因多态性与SLE患者发生补体C3C4下降存在相关性。以AA基因型或A等位基因为参照,存在补体C3C4下降的SLE患者中A1298C位点AC/CC基因型(P=0.007,OR=2.745,95%CI：1.294-5.820)或C等位基因(P=0.007,OR=2.405,95%CI：1.253-4.614)的频率增加。以GG基因型或G等位基因为参照,存在补体C3C4下降的SLE患者中G1793A位点AG/AA基因型(P=0.037,OR=3.211,95%CI：1.028-10.028)或A等位基因(P=0.034,OR=3.125,95%CI：1.038-9.409)的频率增加。未发现MTHFR基因A1298C位点及G1793A位点基因多态性与其它免疫学指标间存在相关性。未发现MTHFR基因C677T位点基因多态性与SLE免疫学指标间存在相关性。5、单倍型分析结果显示,在相加遗传模式下,由MECP2基因rs2239464位点及rs2075596位点构成的单倍型A-A与SLE患者肾脏损害间存在相关性,以不具有A-A单倍型为参照,存在肾脏损害的患者中A-A单倍型的频率增加(P=0.022,OR=2.115,95%CI：1.105-4.047)；在显性及隐性遗传模式下未发现A-A单倍型与SLE肾脏损害间存在相关性。根据AIC值最小原则,相加遗传模式为最优遗传模式。未发现A-A单倍型与其他器官损害间存在相关性。6、单倍型分析结果显示,由MECP2基因rs2239464位点及rs2075596位点构成的单倍型A-A与SLE患者生成抗RNP抗体间存在相关性,在相加及隐性遗传模式下,以不具有A-A单倍型为参照,存在抗RNP抗体的患者中A-A单倍型的频率下降(相加：P=0.006,OR=0.368,95%CI：0.179-0.757；隐性：P=0.014,OR=0.331,95%CI：0.137-0.803)。此时,根据AIC最小值原则相加遗传模式为最优模型。未发现A-A单倍型与其他免疫学指标间存在相关性。7、单倍型分析结果显示,在相加、隐性及显性遗传模型下均未发现由WTHFR基因C677T位点、A1298C位点及G1793A位点构成的单倍型C-A-G及T-A-G与SLE患者器官损害间存在相关性。8、单倍型分析结果显示,由MTHFR基因C677T位点、A1298C位点及G1793A位点构成的单倍型C-A-G与SLE患者生成抗SSA抗体及抗SSB抗体间存在相关性,在相加遗传模式下,以不具有C-A-G单倍型为参照,抗SSA抗体阳性患者(P=0.035,OR=0.494,95%CI.0.515-0.803)及抗SSB抗体阳性患者(P=0.042,OR=0.441,95%CI：0.199-0.977)中C-A-G单倍型的频率均下降；在隐性及显性遗传模式下均未发现C-A-G单倍型与抗SSA抗体及抗SSB抗体的生成相关；此时,根据AIC值最小原则,相加遗传模式为最优模型。MTHFR基因C-A-G单倍型及T-A-G单倍型与SLE患者补体C3C4降低相关,以不具有相应单倍型为参照,补体C3C4降低患者携带C-A-G单倍型(P=0.034,OR=0.459,95%CI：0.221-0.951)或T-A-G单倍型(P=0.033,OR=0.467,95%CI：0.230-0.949)的频率下降；在隐性及显性遗传模式下均未发现C-A-G单倍型及T-A-G单倍型与补体C3C4降低相关；此时,根据AIC值最小原则,相加遗传模式为最优模型。均末发现C-A-G单倍型及T-A-G单倍型与其他SLE免疫学指标间存在相关性。