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【目的】通过四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）法分别检测金叶败毒颗粒药物血清抗人巨细胞病毒（HCMV）感染吸附、穿入、复制三环节的活性,探讨金叶败毒颗粒抗HCMV感染的作用机制。【方法】1.细胞悬液法原代培养人胚肺成纤维细胞（Human embryonic lung fibroblast, HEL）。2. HCMV AD169毒株体外细胞培养法传毒增殖,Reed-Muench法计算病毒半数细胞感染量TCID50。3.制备金叶败毒颗粒药物血清:①将正常成年雌性日本大耳白兔按体重随机分为低、中、高剂量组和空白对照组四组,每组3只;低、中、高剂量组给药量分别为1.5g/Kg、3g/Kg、6g/Kg,相当于成人每次每公斤体重用药剂量的5倍、10倍、20倍,用温双蒸水50ml溶解药物,空白对照组给予等体积的双蒸水;②低、中、高剂量组灌服相应剂量金叶败毒颗粒,空白对照组灌服等体积的双蒸水,每天上、下午各一次,连续3天,第4天上午给药后1h、1.5h、2h、2.5h、3h于兔耳中央动脉采血,血静置2h,3000rpm离心20min,取上层淡黄色透明样血清,56℃水浴灭活30min,一次性滤器过滤除菌,-80℃低温冰箱保存备用;③使用前将所需剂量的血清从-80℃取出,37℃水浴解冻,用细胞维持液将药物血清配置为5%、10%、20%、药物血清-DMEM培养液。4.金叶败毒颗粒药物血清细胞毒性检测:将HEL细胞悬液以1×105 /ml的密度接种于96孔培养板,37℃、5% CO2培养箱培养24小时,用各组药物血清-DMEM培养液干预细胞,细胞病变法（Cytopathogenic Effect, CPE）观察细胞形态变化,MTT法检测OD值,筛选出无细胞毒性的药物血清-DMEN培养液。5.金叶败毒颗粒药物血清抗病毒活性检测:将HEL细胞悬液以1×105 /ml的密度接种于96孔培养板,37℃、5% CO2培养箱培养24小时,先后用100TCID50/100ul的HCMV AD169株100ul、筛选出的无细胞毒性的药物血清-DMEM培养液干预细胞,CPE法观察细胞形态变化,MTT法检测OD值,计算病毒抑制率,筛选出抗病毒活性最高的药物血清-DMEM培养液。6.金叶败毒颗粒药物血清对HCMV吸附、穿入、复制影响的实验研究:将HEL细胞悬液以1×105 /ml的密度接种于96孔培养板,37℃、5% CO2培养箱培养24小时,利用同步感染法（Synchronized infection assays）,先后用100TCID50/100ul的HCMV AD169株100ul、抗病毒活性最高的药物血清-DMEM培养液干预细胞,CPE法观察细胞形态变化,MTT法检测OD值,计算病毒抑制率,评价金叶败毒颗粒药物血清抗HCMV感染吸附、穿入、复制三环节的活性。【结果】1. HCMV AD169毒株半数细胞感染量为10-3.4/100ul。2.金叶败毒颗粒药物血清细胞毒性检测:①低剂量组药物血清:分别在灌胃后1h、1.5h、2h、2.5h、3h采血配置的5%、10%药物血清-DMEM培养液和1h、1.5h采血配置的20%药物血清-DMEM培养液无细胞毒性,与空白对照组药物血清比较差异无显著性意义（p>0.1）。②中剂量组药物血清:分别在灌胃后1h、1.5h、2h、2.5h、3h采血配置的5%、10%药物血清-DMEM培养液和1h、1.5h采血配置的20%药物血清-DMEM培养液无细胞毒性,与空白对照组药物血清比较差异无显著性意义（p>0.1）。③高剂量组药物血清:分别在灌胃后1h、1.5h、2h、2.5h、3h采血配置的5%、10%药物血清-DMEM培养液和1h采血配置的20%药物血清-DMEM培养液无细胞毒性,与空白对照组药物血清比较差异无显著性意义（p>0.1）。3.金叶败毒颗粒药物血清抗病毒活性检测:①中、高剂量组药物血清具有较高的抗HCMV作用,与病毒对照组比较差异有显著性意义（p<0.01）,中剂量组、1.5h、5%药物血清的病毒抑制率达90.90%;②随时间变化,药物血清的抗HCMV作用在1.5h、2h两个采血时相达到高峰,1.5h与2h药物血清组的抗HCMV作用相当,比较差异无显著性意义（p>0.1）;③采血时相为1.5h、2h时,中、高两种剂量组药物血清抗HCMV的作用相当,比较差异无显著性意义（p>0.1）;4.金叶败毒颗粒药物血清对HCMV吸附、穿入、复制影响的实验研究:金叶败毒颗粒药物血清抗HCMV感染吸附、穿入、复制三阶段的病毒抑制率分别为40.43%、37.55%、88.84%,与病毒对照组比较差异有显著性意义（p<0.01）,其中抗HCMV复制的活性最强。【结论】1.药物血清制备的最佳给药剂量为中剂量（3g/Kg）,最佳采血时间为1.5h,体外反应体系中药物血清最佳稀释度为5%; 2.金叶败毒颗粒药物血清具有抗HCMV感染的作用;3.金叶败毒颗粒药物血清对HCMV感染的吸附、穿入、复制三阶段均有抑制作用;4.金叶败毒颗粒药物血清抗HCMV复制的作用最强。