左旋肉碱对牛卵母细胞老化和早期胚胎发育的影响

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在体内或体外,卵母细胞均会发生老化。老化的同时会导致氧化应激,积累活性氧(ROS),对细胞或胚胎产生有害作用。本试验旨在探究左旋肉碱在牛卵母细胞老化和早期胚胎发育的体外培养中的作用,分为两部分试验:试验一:左旋肉碱对牛卵母细胞老化的影响众所周知,左旋肉碱(L-camitine,LC)具有抗氧化作用。本研究探讨了在体外成熟的过程中添加LC对牛卵母细胞老化的影响。在体外成熟的过程中添加LC可提高老化卵母细胞的发育能力。体外受精后,经LC处理的老化卵母细胞的囊胚率显著高于未经处理的老化卵母细胞(P<0.05)。此外,与未处理的老化卵母细胞相比,经LC处理后老化卵母细胞的ROS水平显著降低,谷胱甘肽(GSH)水平显著升高(P<0.05)。LC处理的老化卵母细胞的线粒体膜电位水平、早期凋亡比率以及caspase-3的活性显著低于老化组(P<0.05)。同时,在体外老化过程中,LC处理的老化卵母细胞的抗凋亡相关基因Bcl-xl和Survivin的mRNA水平显著高于未处理的老化卵母细胞(P<0.05)。综上所述,这些结果表明LC能够防止牛卵母细胞的老化以及提高胚胎的发育能力。试验二:左旋肉碱对牛早期胚胎发育的影响老化的卵母细胞经历各种分子、细胞和生化变化。卵母细胞老化导致胚胎的发育能力和质量下降,部分原因被认为是活性氧的积累。本试验意在探究LC对牛老化卵母细胞体外受精后的早期胚胎发育的影响。结果表明,在体外培养(IVC)中添加LC后,LC处理组与老化组的卵裂率无显著差异(P>0.05),但LC处理组的囊胚率显著高于老化组(P<0.05)。此外,经LC处理后胚胎中的ROS水平显著降低,GSH水平显著高于老化组(P<0.05)。三组间线粒体膜电位强度无显著差异(P>0.05)。氧化应激可诱导自噬,LC3是用来检测自噬的标志物,老化组LC3的水平明显高于LC处理组(P<0.05)。经LC处理的胚胎中抗氧化基因GPX4和SOD 1的mRNA水平明显高于老化组(P<0.05)。综上所述,这些结果表明LC可以通过降低氧化应激,提高老化卵母细胞体外受精后的早期胚胎的发育能力。综上,本研究表明LC能够有效延缓卵母细胞老化,提高老化卵母细胞的发育潜能,提高牛胚胎的体外发育率,对牛早期胚胎发育起到促进的作用。
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