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目的:通过观察肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factorα,TNFa）和转化生长因β1（transforminggrowth factorβ1,TGFβ1）两种细胞因子所致肝细胞损伤时胰岛素样生长因子结合蛋白2、4（insulin-like growth factor binding protein2、4,IGFBP2、4）的表达变化,探讨IGFBP2、IGFBP4在肝损伤中的作用机制。方法:1.体外培养人肝细胞株HL-7702,分别给予TNFα、TGFβ1两种刺激因素,采用免疫细胞化学染色方法观察人肝细胞IGFBP2、4的表达情况。其中TNFα以10ng/ml、20ng/ml、30ng/ml、40ng/ml处理24小时;TGFβ1以2ng/ml、4n/ml、8ng/ml、16ng/ml处理24小时,分别设立正常对照组（加入等量PBS）。2.体外培养人肝细胞株HL-7702,分别给予TNFα、TGFβ1两种刺激因素,采用MTT比色法检测两种细胞因子对肝细胞抑制率的影响,浓度和时间点同方法1。3.体外培养人肝细胞株HL-7702,设立正常对照组（加入等量PBS）,以20ng/ml的TNFα处理人肝细胞株48小时,采用特异性高的Annexin-V/PI双染色流式细胞分析法对细胞凋亡进行定量分析,同时采用灵敏度高的TUNEL法原位检测凋亡细胞。结果:1-免疫细胞化学染色体外培养的肝细胞经TNFα和TGFβ1作用后,IGFBP2、4的表达较正常对照组明显增强。各处理组均可见胞浆和胞膜有棕黄或棕褐色颗粒沉着,图像分析结果显示,各处理组与正常对照组相比统计学差异显著,其中TNFα的20ng/ml组和TGFβ1的4ng/ml组表达最强（20ng/ml TNFα组与正常对照组相比,IGFBP2组的表达量为:40.66±5.80 vs 0.53±0.14;IGFBP4组的表达量为:41.16±9.18 vs 0.32±0.08,P＜0.05。4ng/mlTGFβ1组与正常对照组相比,IGFBP2组的表达量为:85.48±6.09 vs 0.53±0.14;IGFBP4组的表达量为:82.48±4.00 vs 0.32±0.08,P＜0.05）。2.MTT比色法TNFα在24h不同浓度情况下,各处理组抑制率与正常对照组相比统计学差异显著（抑制率分别为10ng/ml:28.80、20ng/ml:34.80、30ng/ml:19.60、40ng/ml:18.40,p＜0.05）:TGFβ1在24h不同浓度情况下,除2ng/ml组外其他各处理组与正常对照组相比统计学差异显著（抑制率分别为2ng/ml:2.60、4ng/ml:18.90、8ng/ml:8.24、16ng/ml:10.86,p＜0.05）。3.相关性分析分别将TNFα、TGFβ1诱导后的IGFBP2、4免疫细胞化学染色经图像分析测得的IOD值和其MTT测得的肝细胞抑制率做相关分析,结果提示肝细胞IGFBP2、4的表达与肝细胞的抑制率呈正相关关系,r值分别为:TNFα诱导后IGFBP2与抑制率:0.497（P＜0.05）;IGFBP4与抑制率:0.534（P＜0.05）。TGFβ1诱导后IGFBP2与抑制率:0.642（P＜0.01）;IGFBP4与抑制率:0.600（P＜0.01）。4.Annexin-V/PI双染色流式细胞分析TNFα正常对照组有少量肝细胞凋亡,各处理组与正常对照组相比肝细胞凋亡率明显增加,（7.86±1.10 vs4.76±1.11,P＜0.01）。5.TUNEL法检测细胞核中有棕黄色着染者为阳性细胞,细胞呈典型的凋亡形态学改变,变小、变圆、核固缩;而相对正常的细胞胞核不着染。各处理组与正常对照组相比肝细胞凋亡率明显增加,（21.13±4.61 vs 3.25±1.50,P＜0.01）。结论:TNFα、TGFβ1诱导肝细胞损伤的同时,肝细胞IGFBP2、4的表达显著增加,且IGFBP2、4与肝细胞的抑制率分别呈正相关关系。推测IGFBP2、4可能参与了肝细胞的损伤过程,且在TNFα、TGFβ1介导的肝细胞损伤中可能具有重要作用。