目的: 从组织细胞和分子病理学方面探讨局灶性和多灶性皮质发育障碍导致癫痫发生的可能机制。 方法: 1. 建立冰冻损伤和 γ-射线照射两种 DCDs 大鼠动物模型; 2. 病理检查包括大体标本观察、光镜常规和特殊检查、透射电境超微结构检查等; 3. 采用 SABC 免疫组织化学方法检测神经递质 Glu、GABA,以及受体亚型 NMDAR1、GluR2、GABAAα1 在大鼠脑皮质、海马和杏仁核中的表达,光镜观察,用 GD-8 型病理影像多媒体图文操作系统分析。 4. 用 sas8.0 软件进行统计学分析。 结果: 1. 局灶性 DCDs 鼠大脑组织病理观察 (1)大体标本观察:所有经液氮铜针损伤的大鼠皮质在原损伤处都表现出一典型的微脑回畸形,它与颅中缝线平行,长 3～5mm,距离颅中缝线 2～4mm,大部分涉及感觉皮质第 1 区。微脑回沟离枕部越近微沟越深,到了枕部皮质几乎完全被微脑回分裂开来。 (2)组织和细胞学观察:①常规 H.E.染色示:在大鼠嘴的方向,发育异常的大脑皮质具有典型的三或四层皮质结构,而尾的方向仅二、三层皮质结构或更少;微脑回皮质分层异常,细胞构筑混乱,轴突、树突异常,微沟底侧周围有血管和胶质细胞增生;在微脑回周围皮质可见巨大神经元、巨大星形细胞和巨大贝茨细胞,而皮质下白质也可见巨大的泡状细胞,同侧远离微脑回的海马 CA3 区可见细胞排列紊乱,重庆医科大学硕士研究生学位论文 3细胞丢失。②Nissl 染色见形态异常的神经元核周有成簇的尼氏小体。③LFB 染色可见少部分髓鞘脱失。④Bielschowsky 改良染色示神经原纤维紊乱,部分消失,轴突或树突变细、弯曲、断裂。⑤Cajal 氏氯化金升汞染色示微脑回周围,尤其微沟周围血管和胶质细胞增生。⑥Timm’s 染色未见齿状回颗粒细胞的轴突进入门区形成致密的神经网络,而在 CA3 区液氮损伤组苔藓纤维发芽主要在锥体细胞层,偶尔也可以见于起层。2. 多局灶性 DCDs 鼠大脑组织病理观察(1)大体标本观察:F1 代组鼠的大脑、小脑表面无异常发现。冠状切面可见胼胝体缺失,小脑体积变大、畸形,海马结构异常。(2)组织和细胞学观察:①常规 H.E.染色示:大脑皮质有多个结节状或团块状物,大小不均,其内结构紊乱,细胞形态不清,胶质细胞增生。海马 CA3 区细胞排列紊乱,CA1 区有巨大的环状结节,其中有锥体细胞缺失、异常及大量颗粒细胞增生,CA1 或 CA2 可有中断,杏仁核皮质细胞结构紊乱,成团,小脑皮质可见结节状物;②Nissl 染色可见皮层结构紊乱,结节多位于 2～3 层,海马 CA1 区团块状结构清楚可见,CA2 有中断,CA3 结构紊乱,有向锥体细胞层发芽的趋势;③LFB 染色示部分髓鞘脱失;④Timm’s 染色可见双侧海马 CA3 区苔藓纤维发芽,而齿状回未发现类似变化。3. 超微结构观察:局灶性 DCDs 鼠微脑回周围锥体神经元内线粒体肿胀,内质网扩张,胶质细胞轻度肿胀,毛细血管周围水份积聚,部分髓鞘退变,突触未见明显异常。4. 局灶性 DCDs 鼠脑皮质免疫组化观察:图像分析结果微脑回周围兴奋性 Glu 能神经元增加而抑制性 GABA 能神经元数目选择性减少(P<0.05);NMDAR1、GluR2 受体神经元增加而 GABAAα1 受体神经元数目亦选择性减少(P<0.05)。