【摘 要】
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【目的】研究SIRTs在银屑病中的表达水平是否有变化,为银屑病的临床治疗及预后评估奠定理论基础。【方法】1.动物模型:用咪喹莫特乳膏(明欣利迪)或生理盐水涂抹BABL/c小鼠背
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【目的】研究SIRTs在银屑病中的表达水平是否有变化,为银屑病的临床治疗及预后评估奠定理论基础。【方法】1.动物模型:用咪喹莫特乳膏(明欣利迪)或生理盐水涂抹BABL/c小鼠背部7天,第8天处死小鼠取小鼠背部皮肤。2.细胞实验:TNF-α诱导HaCaT细胞。3.临床病例收集:根据患者年龄、性别、标本采集部位收集临床严重银屑病(PASI>10)标本和良性对照标本。另外,搜集银屑病及皮肤良性病变蜡块。4.利用实时荧光定量PCR技术、免疫蛋白印迹技术检测SIRTs mRNA及其蛋白水平的差异性表达。5.利用免疫荧光技术检测SIRTs蛋白的差异性表达及SIRTs在细胞中的主要定位。6.统计学分析。【结果】1.小鼠银屑病模型表明,BABL/c小鼠背部有明显的红斑、鳞屑和炎症.2.TNF-α诱导HaCaT细胞结果表明:细胞形态、细胞间隙发生表观学改变。3.实时荧光定量PCR技术、免疫蛋白印迹技术和免疫荧光技术结果表明SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4和SIRT5 mRNA和蛋白表达水平降低,而SIRT6和SIRT7呈上升趋势。4.免疫荧光技术显示SIRT1、SIRT2既存在于细胞质也存在于细胞核,SIRT3、SIRT4和SIRT5主要存在于细胞质,SIRT6和SIRT7主要在细胞核;此外,SIRTs在表皮的表达量高于真皮组织。【结论】SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4和SIRT5在银屑病皮损及TNF-α诱导的HaCaT细胞中较正常对照组表达量降低,而SIRT6和SIRT7表达水平则呈上升。
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