Notch信号通路对眼表病理变化的影响

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目的多糖结合体在粘膜表面起着一系列生物调节功能,例如有丝分裂后表皮细胞的分化和粘膜表层湿态的维持。本实验目的是确认在正常人和于眼病人中眼表结膜总的基因表达差异。方法通过细胞印记学方法得到研究对象的结膜表层细胞,分离,扩增细胞的RNA,然后于特异性设计的多糖基因芯片杂交。再对杂交后的密度值用ANOVA软件分析。所分析后的表达结果用实时定量PCR进行确定。免疫荧光检测Notch受体和配体后用共聚焦显微镜确认。结果通过基因芯片分析,眼表结膜有424个多糖相关基因。半乳糖凝集素,糖基转移酶,黏液素,Notch型号通路相关分子,蛋白聚糖位于最高表达组。在干眼病人中,46个多糖基因明显的有统计学意义的表达下调,其中有5个分子是属于Notch信号通路的,4分子属于个Wnt信号通路的,3个硫酸肝素转移酶。仅仅有干扰素诱导的跨膜蛋白1上调。通过实时定量PCR,我们发现Notch信号通路中Notch1,Notch3,Jaggedl的表达率在干眼病人中只有正常病人的0.43,0.56和0.50。共聚焦显微镜显示Notch1, Notch3, Jagged1分子在整个结膜组织中从表层到基底层都有表达,而Notch2和Delta1只在结膜表层有表达。结论本实验揭示了在正常人眼和干眼病人表面糖基因的表达图谱和差异;Notch信号通路在干眼病人眼表的表达下调也许是干眼的发病机理之一。
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