梭梭HaCMO和HaBADH基因的克隆及植物表达载体构建

来源 :宁夏大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caifubaguoguo
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
土壤盐渍化严重影响植物的生长和发育,制约着当今农业生产发展。甜菜碱是现已发现的最好的渗透调节物质之一,在植物体内由胆碱经两步化学反应生成,胆碱-甜菜碱醛-甜菜碱。催化两步反应的分别是胆碱单加氧酶和甜菜碱醛脱氢酶。   本实验采用RT-PCR、RACE等方法从超旱生、耐盐植物梭梭(Haloxylon ammodendron)中扩增出甜菜碱合成过程中限速酶胆碱单加氧酶(CMO)编码基因的cDNA序列(命名为HaCMO)和甜菜碱醛脱氢酶(BADH)编码基因的cDNA序列(命名为HaBADH)。HaCMO的cDNA全长为1424bp,包含一个完整的开放阅读框,长度为1344bp,推测其编码的氨基酸序列全长为447个氨基酸残基。HaBADH的cDNA全长为1522bp,包含一个完整的开放阅读框,长度为1503bp,推测其编码的氨基酸序列全长为500个氨基酸残基,并在257~266位包含醛脱氢酶所具有的高度保守的十肽序列(VTLELGGKSP)以及在第294位点上含有与酶功能有关的半胱氨酸残基(C)。HaCMO核苷酸序列与藜科几种盐生植物如菠菜(Spinacia oleracea)、山菠菜(Atriplex hortensis)、辽宁碱蓬(Suaeda liaotungensis)、盐角草(Salicornia europaea)和甜菜(Beta vulgaris)等的一致性均在74.5%以上,推导编码蛋白的氨基酸序列一致性均在73.5%以上,表明CMO基因在藜科植物中是一种较保守的基因。HaBADH核苷酸序列与藜科几种盐生植物如盐爪爪(Kalidium foliatum)、中亚滨藜(Atriplex centralasiatica)、三角叶滨藜(Atriplex triangularis)、菠菜、山菠菜和甜菜等的同源性均在85%以上,推导编码蛋白的氨基酸序列一致性均在87%以上,表明BADH基因在藜科植物中是一种非常保守的基因。   以获得的HaCMO和HaBADH完整开放阅读框为目的基因,构建重组植物表达载体pCAMBIA2300-HaCMO和pCAMBIA2300-HaBADH,通过农杆菌介导法成功导入水稻愈伤组织,并获得了转基因植株。研究结果为从分子水平探明梭梭的抗旱、耐盐机制,利用其抗逆基因对其他植物尤其是农作物进行转化奠定了基础。
其他文献
该文选用SHBWR状态方程来预测N-Ar-O物系的相平衡数据,并将二元相互作用系数K关联成温度T的非线性函数.提高了相平衡的计算精度. 提出了一个适合于规整填料塔的精馏模型-二维
  目的 总结我科颅颌面中心在颌面部畸形矫治方面的临床经验。患者选择对常见的颌面畸形进行分类,包括上颌前突、下颌前突、上颌后缩、偏颌、双颌前突、下颌后缩等等。方法
邻苯二甲酸酯类化合物(phthalateestersPAEs)作为增塑剂广泛应用于工业和生活用品中,由于它可增加塑料的可塑性和弹性,越来越广泛地应用于塑料工业,其毒性效应已经得到环境和医药学家的极大关注。邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(C_(24)H_(38)O_4),是邻苯二甲酸酯类化合物中的一种,是应用于塑料行业最重要的增塑剂。由于其难降解,污染来源广,污染水平高,毒性广,已被我国列为优先监测的
酯基季铵盐属阳离子表面活性剂,由于其具有良好的生物降解性,被誉为“绿色表面活性剂”,而倍受青睐。本论文合成了三种双酯基羟乙基季铵盐,并对其合成过程、物化性能及应用性能进
  目的:对骨性下颌前突患者术前及BSSRO后退术后进行颅颌面三维CBCT扫描,通过计算机三维测量软件重建其颅颌面骨形态并测量术前及术后髁突位置变化相关指标,观察BSSRO后退术后
  目的 矢状缝早闭表现为严重的舟状头畸形,畸形生长的颅骨又使颅腔变形,阻碍大脑的正常发育,致使颅内压升高,部分患儿的智力发育受到影响。严重的头颅畸形还会影响儿童的心理
  目的:根据颧部软组织的解剖学特点,设计口内入路颧骨颧弓降低术时同步将颧部软组织向上提升悬吊的方式,避免颧骨、颧弓降低术后面中部组织松垂并发症的发生。方法利用颧骨颧
  颅缝早闭是由单条或者多条颅缝提前闭合所导致的疾病,其在新生儿中的发病率为1/2500.颅缝早闭可分为两大类:综合征型和非综合征型.非综合征型通常以其早闭的颅缝命名,而综合
新城疫(Newcastle disease, ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的一种急性、高度接触性禽类传染病,对养禽业造成的损害十分严重,被国际兽医局定为Ⅰ类传染
该文主要采用超细ZrO为载体,用沉淀沉积法(DP)制备CuO/ZrO催化剂,以其作为主要研究对象,另外,还用浸渍(Im)、共沉淀(CP)和复合气凝胶(MA)法制备出不同的催化剂作为对比,用以