微藻叶绿素铜钠盐的制备及其它生物活性物质的提取分离

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微藻是指含有叶绿素a并能进行光合作用的单细胞生物质。微藻含有多种具高经济价值的生物活性成分。微藻生长迅速、易培养、不受场地季节限制及生产规模的可调控的特性,作为实验原料不但有利于节约成本,还可保证资源供应。因此,综合开发利用微藻具有重要的现实意义。本论文对叶绿素铜钠盐的传统制备工艺进行改进,使叶绿素的提取及铜代同时进行,以利于保护提取出的叶绿素免受破坏,提高产率和产品的质量,使叶绿素初步转变为较稳定的叶绿素铜酸后,采取再铜化的方法制备配位度更高的产品。实验对叶绿素铜钠盐生产工艺条件进行了优化,实验结果表明:微藻原料在超声处理30min,85℃提取5h,初次铜代时投入25mL5%CuSO4溶液,皂化加时间为60min,皂化温度为70℃,用0.5mol/L KOH-C2H5OH溶液调节皂化pH为11,再次铜化时加入5mL10%CuSO4溶液的条件下,产率为85.3%,质量达到国家标准GB3262-1982的叶绿素铜钠盐产品。本工艺在产率、质量及稳定性方面比传统提制工艺所得产品具有明显的优势。采用微波法对提取叶绿素后的藻渣进行果胶提取,实验表明,微波提取果胶的最佳工艺条件为:30g原料,以500ml30%HCl,720W微波提取10min,活性炭45g/硅藻土5g吸附脱色0.5h,以原液:95%乙醇=1:3的比例醇沉析出果胶3.97g,产率13.83%,所得果胶产品是具高色泽度的白色粉末,经分析确定为低甲氧基果胶,质量参照HMP的标准GBn246-85,为合格产品,而且对比传统水浴提取法,时间短、产率高及能耗少。以提取叶绿素后萃取所得不皂化物浓缩液为原料,分别以石油醚:丙酮=9:1及7:3的混合液洗脱负载类胡萝卜的层析液的硅胶柱,收集第①和②层色带,经检测定性分析,它们分别是β-胡萝卜素及叶黄素。
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