人溶菌酶（Human lysozyme，hLY）广泛存在于人体各组织和细胞中，能够有效水解N-乙酰胞壁酸与N-乙酰氨基葡萄糖胺之间的β-1,4糖苷键，导致细胞壁破裂，胞内物质逸出，细菌溶解死亡，是人体重要的免疫防御因子。人溶菌酶在人体内环境中呈带正电荷状态，能与体内带负电荷的病毒相结合，形成复合体，导致病毒失活。人溶菌酶具有较强的抗菌、消炎和抗病毒等作用，对开发新的抗菌药物具有重要的意义。人碱性成纤维细胞生长因子（Human basic fibroblast growthfactor，hbFGF）是一种广泛存在于人体各种组织细胞中的生物活性物质。它是成纤维细胞生长因子家族之一，也是体内重要的创伤愈合因子之一，在体内外具有强烈的血管生成、创伤愈合和组织修复的作用。在创伤愈合过程中，为了更好地发挥两种蛋白的功能，同时考虑到两种蛋白的空间结构以及人体创伤处具有多种凝血酶，本研究拟将两种蛋白融合，并在两者之间引入凝血酶识别位点（LVPRGS），构建出能够在创伤处被切开、具有抗菌消炎和组织修复等多重功能的新型融合蛋白。本研究结果如下：一、从人外周血细胞中提取人溶菌酶mRNA，利用RT-PCR方法扩增得到人溶菌酶cDNA，构建人溶菌酶的真核表达载体，并在毕赤酵母中分泌表达。通过对发酵条件的优化，采用改良舒加法测得人溶菌酶的活性达533U/ml；二、设计特定引物，利用重叠PCR方法，将人溶菌酶基因与人碱性成纤维细胞生长因子基因融合，中间引入凝血酶识别位点氨基酸的碱基序列，构建表达载体pPIC9K-hly-thrsite-hbfgf，并在毕赤酵母中进行分泌表达。采用改良舒加法测得融合蛋白人溶菌酶活性为42U/ml；三、经硫酸铵沉淀、Sephadex G-75凝胶层析分离纯化，得到纯化的融合蛋白，融合蛋白经凝血酶切割并分析产物活性，实验结果表明，酶切产物的溶菌酶活性为416U/ml，与酶切前活性相比有很大提高。