光合细菌分离鉴定及其应用研究

来源 :昆明理工大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:imanhuaa
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光合细菌降解各种有机污染物的能力较强、成本低,效果好,而且无二次污染等优点,使其成为了目前治理有机废水污染的研究热点,我国现阶段使用的菌种多数都是从国外引进,使用中出现不稳定现象和处理效果差等问题。因此,为了提高光合细菌利用效果,有必要从本地筛选高效净化有机废水的光合细菌。本论文从日盛食品有限公司污水处理池和滇池湿地公园入口处污水中分离出5株光合细菌,根据其形态结构、培养特征、活细胞吸收光谱和16SrRNA测定对分离到的光合细菌进行了分类鉴定,并对其进行了系统发育研究。本论文还对分离到的光合细菌代谢甲醛、苯系物的能力以及净化甘蔗废糖蜜的效果进行了初步的研究。获得如下主要结果:1、菌株的16S rRNA序列测定结果表明:菌株RX-1与类球形红细菌亲缘关系最近,其序列相似性为92%,在系统发育关系上应属于红细菌属;菌株RX-2与沼泽红假单胞菌亲缘关系最近,其序列相似性为100%,在系统发育关系上应属于红假单胞菌属;菌株DC-1与荚膜红细菌亲缘关系最近,其序列相似性为98%,在系统发育关系上应属于红细菌属;菌株DC-2与沼泽红假单胞菌亲缘关系最近,其序列相似性为98%,在系统发育关系上应属于红假单胞菌属;菌株DC-3与荚膜红细菌亲缘关系最近,其序列相似性为97%,在系统发育关系上应属于红细菌属。经序列比对,菌株RX-2与菌株DC-2不是同一种沼泽红假单胞菌,菌株DC-1与菌株DC-3不是同一种荚膜红细菌。生理生化研究表明5株光合细菌生长过程中都不产生氧气,都属于革兰氏阴性菌,属不产氧光合细菌中的紫色非硫光合细菌类群。5株光合细菌菌株培养的最适温度为30℃,最适pH值为7.0,最适接种量为20%。2、5株光合细菌菌株净化液体甲醛的能力不同:菌株RX-1和DC-1能净化2mM甲醛,耐受4mM甲醛;菌株RX-2和DC-2分别能净化2mM和4mM甲醛,但都能耐受6mM甲醛;菌株DC-3能净化6mM甲醛,耐受8mM甲醛。5株光合细菌中,菌株DC-3净化和耐受甲醛能力最强。3、13C-NMR分析光合细菌甲醛代谢产物表明RX-1将4mM甲醛代谢转化为甲酸、乙醛酸、葡萄糖([U-13C]Gluc)、羟基丙酮酸(DHA)、果糖([U-13C]Fruc)、丙氨酸(Ala)和谷胱甘肽(GSH),推测RX-1的主要代谢途径为谷胱甘肽依赖型甲醛脱氢酶异化途径、核酮糖单磷酸途径和丝氨酸循环途径;RX-2能将4mM甲醛代谢转化为[2-13C]Ser、Ala和GSH,推测RX-2主要代谢途径为丝氨酸循环途径;DC-1能将4mM甲醛代谢转化为[U-13C]Gluc、[U-13C]Fruc、DHA、[2-13C]Ser、[2-13C]Gly和苹果酸([2-13C]Mal),推测DC-1的主要代谢途径为核酮糖单磷酸途径和丝氨酸循环途径;DC-2能将4mM甲醛代谢转化为[U-13C]Fruc、甲酸和GSH,推测DC-2的主要代谢途径为核酮糖单磷酸途径和谷胱甘肽依赖型甲醛脱氢酶异化途径;DC-3能将4mM甲醛代谢转化为[U-13C]Gluc、[U-13C]Fruc、[2-13C]Ser 和 Ala,推测 DC-3 的主要代谢途径为核酮糖单磷酸途径和丝氨酸循环途径。4、5株光合细菌对苯系物的净化效果和耐受程度不同:在接种量20%,pH7和30℃条件下,菌株RX-1能将6mM苯、2mM甲苯和4mM二甲苯分别用8d、6d和8d完全吸收净化,对苯、甲苯和二甲苯的耐受浓度分别为6mM、4mM和4mM;菌株RX-2能将6mM苯、2mM甲苯和2mM二甲苯分别用8d、7d和7d完全吸收净化,对苯、甲苯和二甲苯的耐受浓度分别为8mM、4mM和4mM;菌株DC-1能将4mM苯、2mM甲苯和2mM二甲苯用8d时间都能完全吸收净化,对苯、甲苯和二甲苯的耐受浓度分别为4mM、4mM和2mM;菌株DC-2能将6mM苯、4mM甲苯和2mM二甲苯分别用6d、8d和7d完全吸收净化,对苯、甲苯和二甲苯的耐受浓度分别为12mM、6mM和4mM;菌株DC-3能将2mM苯用7d完全吸收净化,但不能完全吸收甲苯和二甲苯,对苯、甲苯和二甲苯的耐受浓度都为4mM。5、用5株光合细菌、芽胞杆菌及菌株DC-1与芽胞杆菌的混合菌液分别处理不同浓度的甘蔗废糖蜜,试验结果表明:5株光合细菌RX-1,RX-2,DC-1,DC-2和DC-3对浓度为0.5‰的甘蔗废糖蜜处理效果最好,COD 去除率分别为 77.81%,82.17%,91.19%,86.62%和 87.99%,以DC-1处理效果最好,COD去除率达到了 91.19%;芽胞杆菌COD去除率达到了 74.68%;菌株DC-1和芽胞杆菌的混合菌液对甘蔗废糖蜜的净化能力最高,COD去除率达到了 96.16%。
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