经角膜电刺激对大鼠视神经损伤后视网膜小胶质细胞活性影响的研究

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目的探讨经角膜电刺激(transcorneal electrical stimulation, TES)对视神经损伤后视网膜小胶质细胞(1etinal microglia cells, RMGs)活性及肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)表达的影响。方法研究TES对视神经横断伤(optic nerve transection, ONT)后视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells, RGCs)存活及RMGs活化的影响。以成年雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠为研究对象,将90只成年雄性SD大鼠随机分成以下3组:对照组(Control组);ONT+假刺激组(ONT+Sham组):ONT+TES组(()NT+TES组)。荧光金(fluorogold, FG)经双侧上丘逆行标记视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs),7d后制作ONT模型。Control组只暴露视神经但不切断视神经;ONT+Sham组在术后Od、4d及0d、4d、7d、10d给予假性TES; ONT+TES组在术后0d、4d及0d、4d、7d、10d给予TES。上述各组在术后7d及14d运用视网膜铺片及免疫荧光技术行RGCs及RMGs计数;应用荧光双标染色法检测TNF-α与RMGs是否共同表达;同时对术后7d及14d各组大鼠视网膜TNF-α的表达水平进行检测。结果与Control组比较,ONT后7d及14d视网膜的RGCs数量显著减少,RMGs数量显著增多,且RMGs由静止状态转变为活化状态。ONT后7d及14d, ONT+TES组存活的RGCs数显著高于ONT+Sham组;ONT后7d,ONT+TES组活化的RMGs数及阿米巴样的RMGs数显著低于ONT+Sham组:ONT后14d,ONT+TES组活化的RMGs数与ONT+Sham组相比无明显差异,但是其阿米巴样的RMGs数显著低于ONT+Sham组。免疫荧光双标染色显示ONT后7d,TNF-α表达于阿米巴样的IMGs中;ONT后14d,TNF-α表达于所有类型的RMGs中。与Control组比较,ONT后7d及14d视网膜的TNF-α的表达显著增加,而()NT+TES组TNF-α的表达明显低于ONT+Sham组。结论我们的研究发现视神经损伤会激活RMGs,增加促炎因子TNF-α的表达。TES可能通过抑制神经损伤后RMGs的增殖活化,降低TNF-α的表达,进而减轻RGCs的凋亡,发挥神经保护作用。
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