宫颈癌U14细胞正丁醇提取物脂质体瘤苗的制备及其抑瘤效应观察

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肿瘤疫苗是肿瘤主动免疫治疗的重要手段,其核心问题是肿瘤抗原的免疫原性。为提高肿瘤抗原的免疫原性,对抗原的修饰非常重要。脂质体作为一种无毒、无免疫原性的生物载体已得到广泛的应用,以脂质体负载抗原是增强肿瘤抗原免疫原性的有效方法之一。本课题采用阴离子脂质体制备宫颈癌U14细胞抗原瘤苗,实验观察其免疫效应和抑瘤作用,以探讨脂质体瘤苗用作肿瘤免疫治疗的可能性。正丁醇法提取U14细胞表面抗原(CBE),以PC,PG,Chol制成阴离子脂质体,运用薄膜水合法和超声粉碎、过膜相结合的方法,将CBE包裹入阴离子脂质体制成CBE-脂质体瘤苗。瘤苗(含CBE 50μg)腹腔接种免疫Km小鼠,每周一次,共2次。分别在末次免疫后的1、2、3、4周取血,用间接ELISA法检测血清抗CBE特异性抗体。此后,同法免疫Km小鼠,在末次免疫一周后,再腹腔接种104 U14细胞/每鼠,记录荷瘤动物的生存时间,观察瘤苗对后续U14细胞负荷攻击的免疫保护作用。实验发现:经CBE-脂质体瘤苗免疫的小鼠血清中有显著的抗CBE抗体生成,抗体滴度在末次免疫后的第2周开始升高,第3周达到高峰,此后保持一段时间。单纯CBE免疫也可产生抗CBE抗体,但各时间抗体滴度均明显低于瘤苗组(P<0.05)。抑瘤实验结果证实,瘤苗免疫组的荷瘤小鼠平均生存时间为25.50±2.08天,明显长于空白对照组(18.00±0.00天)、单纯脂质体组(18.33± 0.52天)和单纯CBE组(19.33±1.75天),t检验表明有非常显著的差异(P<0.01);单纯CBE组的生存时间较对照组有所延长,但差异无显著性(P>0.05)。 瘤苗免疫组尚有33%的动物无瘤生存期超过60天。 本研究结果表明,脂质体包裹抗原能显著提高肿瘤抗原的免疫原性,激发出更强的体液免疫反应,并对后续腹腔攻击的相关肿瘤细胞产生明显的生长抑制作用。脂质体包被的肿瘤抗原是一种安全、有效的瘤苗,其在肿瘤主动免疫治疗中的作用值得进一步研究。
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