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背景改善生活质量,提高健康水平,是一个国家社会经济持续稳定发展的基础。快速、准确的诊断方法对疾病的预防与治疗至关重要。目前临床疾病的诊断,主要由拥有众多大型仪器设备的中心实验室完成,需要专业技术人员操作,对样本的要求较高,检查费用也较高。与传统的检测方法相比,侧向免疫层析试纸条(lateral flow immunochromatographic strip,LFICS)以其快速、简单、经济等优势,已被广泛应用到食品安全问题、环境安全问题的监测,毒品检测以及临床疾病的诊断等领域。侧向免疫层析试纸条的标记物主要有胶体金、纳米碳、纳米硒、胶体乳等,可通过肉眼直接辨别结果,常用于定性或半定量检测;而荧光微球、量子点、免疫磁珠、纳米酶等标记物,通常借助一些仪器设备用于定量检测。以胶体金标记为主的定性检测试纸是市场上最常用的侧向免疫层析试纸条,但是,由于胶体金的制备需要高温沸腾,原料价格昂贵,因此,仍需找到一种制备更加简单,成本更加经济的纳米标记材料。与胶体金相比,纳米硒具有常温制备、方法简单、结构稳定、原材料经济等优点,已经逐渐被用于侧向免疫层析试纸条的制备。然而,纳米硒从发现到现在,由于缺乏统一的适用于侧向免疫层析试纸条的纳米硒制备方案,导致这么多年,发展缓慢,应用并不广泛。目的1.寻找一种高效、经济、简单的适用于侧向免疫层析标记的纳米硒制备方案。2.把该方案制得的纳米硒作为标记物,验证其在侧向免疫层析中的应用。方法1.采用抗坏血酸还原法制备纳米硒,以阿拉伯树胶粉(gum arabic,GA)、明胶(gelatin)、十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)、聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)等为稳定剂制备纳米硒,通过形态学观察以及透射电镜表征分析,比较纳米硒的悬浮稳定性、形貌特征以及粒径分布,筛选出一种更适合制备LFICS的纳米硒制备方案。2.用筛选出的方案制备纳米硒,并将其应用于竞争法以及夹心法侧向免疫层析试纸条的制备,竞争法以检测盐酸克伦特罗(clebuterol hydrochloride,CLE)为例,夹心法以检测人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)为例,同时对其灵敏度、特异性、稳定性进行鉴定。3.用胶体金做校验,比较最佳制备条件下纳米硒与胶体金侧向免疫层析试纸条的制备成本及灵敏度差异。结果1.通过比较不同稳定剂制备的纳米硒特性,筛选出了一种更加高效、简便、经济的纳米硒制备方案:以5 m M SDS+100 m M PEG为稳定剂,用16 m M的抗坏血酸还原2m M的亚硒酸,得到平均粒径为36.63 nm分散均匀的球形颗粒。2.以SDS+PEG为稳定剂制备的纳米硒可用于LFICS的制备。竞争法以检测CLE为例,制备出的纳米硒试纸条灵敏度为3 ng/m L;夹心法以检测HCG为例,制备出的纳米硒试纸条灵敏度达到国家最低检出限25 m IU/m L;两种试纸条都具有良好的灵敏度与特异性,检测效果与市售试纸条相当。3.以检测CLE为例,将纳米硒用做竞争法试纸条的标记物时,与胶体金相比,其制备成本降低了30%,灵敏度提高了25%;以检测HCG为例用于夹心法试纸条的制备中,纳米硒与胶体金的制备成本与灵敏度一致。结论1.本研究提供了一种以SDS+PEG为稳定剂的纳米硒制备方案,得到了粒径均一,分散均匀的球形纳米硒粒子。2.该方案制备出的纳米硒可作为LFICS的标记物,且纳米硒在竞争法试纸条的制备中,具有灵敏度高,制备成本低的特点。