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目的:本课题研究电针“内关”、“神门”对焦虑模型大鼠下丘脑、垂体利钠肽的影响,探索针刺“宁心安神”治疗焦虑障碍的中枢利钠肽作用机理,为针刺“宁心安神”抗焦虑的神经内分泌机制研究提供前期科学实验基础。 方法:选用清洁级SD雄性大鼠,按体重完全随机分为三组,即空白组、模型组和针刺组。参照文献建立慢性不可预知应激焦虑动物模型(Chronic unpredictable stress,CUS)。取单侧“内关”、“神门”针刺,每隔一天一次,左右交替。疏密波,频率15/25 Hz,每次15min,刺激强度以大鼠针刺侧轻微抖动为度。通过高架十字迷宫实验(elevated plus maze test,EPM)、敞箱实验(open-field test,OFT)对各组大鼠进行行为学测试,运用免疫组化法检测下丘脑与垂体区心房利钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)及其受体(natriuretic peptide receptor,NPRA),以及下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素(Corticotropin-Releasing Hormone,CRH)表达,利用原位杂交技术检测下丘脑与垂体ANPmRNA的表达,利用酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,Elisa)来检测血浆皮质酮(Corticosterone,CORT)含量。 结果: 1、行为学测试结果:(1)EPM:OE%值,模型组相比空白组有明显降低(P<0.05),针刺组较模型组有明显升高(P<0.05);OT%值,组间比较未现统计学差异,但模型组相比空白组有所下降,而针刺组较模型组有上升趋势。(2)OFT:垂直运动次数,模型组较空白组有下降趋势,而针刺组相比模型组有上升趋势。针刺治疗后,OE%值到达正常,其余行为学指标总体趋于或接近正常。 2、下丘脑各组ANP相关指标检测结果:(1)ANP:与空白组相比,模型组ANP水平明显低于空白组(P<0.05);与模型组比较,针刺组ANP水平显著高于模型组(P<0.01)。(2)NPR-A:各组比较无统计学差异,模型组与空白组相比,下丘脑NPR-A表达有降低趋势,针刺组相比模型组则有升高趋势,针刺组趋向空白组。(3)NPR-AmRNA:各组比较的趋势同指标NPRA。 3、垂体各组ANP相关指标检测结果:(1)ANP:模型组和针刺组与空白组ANP水平均有显著增高(P=0.01)。(2)NPR-A:三组NPR-A水平相比没有显著性差异,但针刺组更靠近空白组。(3)NPR-AmRNA:模型组和空白组相比有降低趋势,而针刺组相比空白组降低明显(P<0.01)。 4、HPA轴相关指标检测结果:(1)下丘脑CRH:模型组较空白组CRH水平显著增加(P<0.05),而针刺组较模型组明显降低(P<0.05),针刺组CRH水平接近正常。(2)血浆CRH:血浆中CRH水平在三组间比较也没有显著性差异,但模型组与空白组相比有增高倾向,针刺组相比模型组血浆CRH有下降趋势,针刺组接近正常水平。(3)血浆CORT:模型组较空白组有较为明显的升高趋势,而针刺组相比模型组有明显降低(P<0.05)。 结论: 1、针刺“内关”、“神门”穴区对焦虑模型大鼠的焦虑行为表现出一定的改善作用。 2、针刺的这一作用可能通过激活下丘脑ANP及其受体系统,抑制HPA轴的活性而实现的。ANP-HPA轴系统可能为针刺“宁心安神”治疗焦虑障碍的关键环节。