MiR-224对宫颈癌HeLa细胞自噬相关蛋白p62的影响

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:goubo
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目的:验证miR-224在宫颈癌HeLa细胞中表达上调,并探讨miR-224对宫颈癌HeLa细胞中自噬相关蛋白p62的影响。方法:釆用实时荧光定量PCR法检测宫颈癌细胞(HeLa)和正常上皮细胞(293T)中miR-224的表达水平,并通过Western Blot技术检测上述细胞中p62蛋白的表达水平。利用细胞瞬时转染技术升高或降低HeLa细胞中miR-224的表达水平,设为miR-224模拟物组(M组)、miR-224模拟物阴性对照组(NC组)、miR-224抑制物组(IN组)、miR-224抑制物阴性对照组(INC组),采用实时荧光定量PCR方法确定转染效率。确定转染成功后利用Western blot方法检测各组细胞中自噬相关基因蛋白p62的表达水平。结果:1、HeLa细胞中miR-224的表达水平(0.151±0.014)高于293T细胞中miR-224的表达水平(6.732±1.33),差异有统计学意义(P<0.05);2、HeLa细胞中p62蛋白的表达水平(0.608±0.021)低于293T细胞中p62蛋白的表达水平(0.888±0.033),差异有统计学意义(P<0.05);3、HeLa细胞转染后,miR-224模拟物组(M组)中miR-224的表达量较miR-224模拟物阴性对照组(NC组)增加了25.13倍,其p62蛋白表达水平降低至74%;与miR-224抑制物阴性对照组(INC组)相比,miR-224抑制物组(IN组)中miR-224表达降低至24%,而p62蛋白表达水平增加了1.71倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1、宫颈癌HeLa细胞中miR-224呈高表达,提示miR-224在宫颈癌中可能发挥了促癌作用;2、宫颈癌HeLa细胞自噬活性高于正常上皮细胞;过表达miR-224可能会促进宫颈癌HeLa细胞的自噬活性;低表达miR-224可能会抑制宫颈癌HeLa细胞的自噬活性,提示miR-224可能是通过影响细胞的姿势进而影响宫颈癌细胞的生物学行为。
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