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背景:脑出血(ICH)具有病情进展快,以及较高的发病率,致死率和致残率等特点。许多研究显示,氧化应激在脑出血损伤中起着重要作用。CTRP3是一个新近发现的脂肪因子,研究表明CTRP 3在炎症、新陈代谢、凋亡、血管生成、心脏保护等方面有着重要的作用。在小鼠心肌缺血模型中,CTRP 3可以通过减少心肌细胞凋亡和促进心脏血管生成使心脏功能得以改善。NADPH酶在氧化应激中占主导地位,NADPH亚基NOX 2在氧化应激中具有重要意义。但在脑出血模型中,CTRP 3对脑出血后的氧化应激损伤是否具有保护作用,迄今尚未见相关研究报道。目标:(1)通过体内脑出血模型的建立,探讨CTRP 3在脑出血中是否具有保护作用;(2)通过研究CRTP3是否通过PKA/NOX 2通路参与氧化应激反应的调控,并阐明其作用的机制。方法:(1)探究氧化应激损伤时间点的选择。将实验动物随机分为假手术组(sham)、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h脑出血模型组,观察氧化应激相关酶NOX 2的表达情况,并选择NOX 2表达量最多的时间点来进行后续研究。(2)CTRP 3的脑保护作用。将实验动物随机分为假手术组(sham)、脑出血组、脑出血试剂对照组、出血药物组(重组或慢病毒过表达CTRP 3)。给药方式为侧脑室注射。观察CTRP 3的神经保护作用并探讨可能机制:对各组大鼠脑出血模型给予神经功能学评分,测定脑含水量、血脑屏障通透性,Western Blot测定脑组织中CTRP 3、PKA、NOX 2蛋白的表达,QPCR测定脑组织中CTRP 3、NOX 2的m RNA水平,SOD、MDA、GSH试剂盒进对氧化应激损伤进行评价,免疫组化测定脑组织切片中NOX 2的表达情况。(3)CTRP 3通过PKA/NOX 2通路参与氧化应激反应调控的机制研究。分别给予PKA激动剂和抑制剂处理脑出血模型,对各组大鼠脑出血建模后给以神经功能学评分,测定脑含水量、血脑屏障通透性,Western Blot测定脑组织中PKA、NOX 2蛋白的表达,SOD、MDA试剂盒进对氧化应激损伤进行评价。结果:(1)建立脑出血模型后NOX 2的表达水平增加,在建模24 h后NOX 2的表达相对最高。(2)重组或慢病毒过表达CTRP 3均明显减轻脑出血后的行为缺失症状,脑水肿及血脑屏障的通透性,增加CTRP 3和PKA蛋白的表达,降低NOX 2蛋白和m RNA的表达,同时下调MDA,上调SOD和GSH等氧化应激等检测指标的表达,并降低脑组织切片中NOX 2的表达。(3)给予PKA激动剂处理上调PKA蛋白表达,降低NOX 2的蛋白水平,降低脑水肿及血脑屏障通透性,降低氧化应激损伤;给予PKA抑制剂处理后NOX 2的蛋白表达上调,加重脑组织损伤。结论:(1)CTRP3在脑出血后氧化应激损伤中具有保护作用;(2)CRTP 3能降低NOX 2的表达,降低氧化应激损伤反应,这种改变是通过上调PKA的表达实现的。