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[背景与目的]胰腺癌是消化系统肿瘤中预后最差的一种,严重威胁着人类的健康,基因治疗被认为是肿瘤治疗的新模式,目前已经多项利用HSV治疗肿瘤的研究已完成,获得了其安全性和效果的初步数据,但在胰腺癌仍然是空白。本实验目的：1.检测重组鼠源GM-CSF单纯疱疹病毒注射液(HSVGM-CSF)在体外对于鼠胰腺癌PANC-2细胞的杀伤能力2.观察瘤内注射重组鼠源GM-CSF单纯疱疹病毒注射液对胰腺癌小鼠移植瘤模型的治疗效果及探寻其可能的作用机制。[材料与方法]1.体外培养鼠源胰腺癌PANC-2细胞,采用四甲基偶氮唑盐比色法(methy thiazolyl tetrazolium, MTT)检测12种不同浓度重组鼠源GM-CSF基因单纯疱疹病毒(HSVGM-CSF)对PANC-2细胞的抑制情况2.建立小鼠胰腺癌移植瘤模型后,取出肿瘤,将肿瘤剪成2mm3左右的小块,送至无菌的研磨器中,加入适量的生理盐水后研磨,制成细胞匀浆,用注射器接种至新引进的小鼠右侧腋窝处。接种后按体重随机分为4组给药,包括空白对照组,高剂量组(1×107plaque forming units(pfu)/瘤),中剂量组(5×106pflJ/瘤),和低剂量组(5×105pfu/瘤)。给药途径为肿瘤内注射。给药开始后,每3天测量体重并用游标卡尺测量肿瘤长短径数据,给药后观察15天,颈部脱臼处死动物,剥离取出肿瘤称重后,保存于10%甲醛溶液中。根据第15天的肿瘤的重量,体积和相对体积变化评估药物效果。另外,在注射HSVGM-CSF后的1,2,3,4天,通过鼠尾静脉抽取小鼠血浆,通过聚合酶联免疫吸附试验Elisa法测量小鼠血浆中GM-CSF的表达水平。[结果]1.通过MTT比色法观察到12种不同浓度重组鼠源GM-CSF基因单纯疱疹病毒GM-CSF皆能够显著地抑制PANC-2细胞生长,并且存在明显的量效反应关系。2.实验组荷瘤小鼠瘤内注射重组鼠源GM-CSF单纯疱疹病毒注射液15天后,肿瘤增殖速度与空白对照组相比明显减缓,存在统计学差异(p<0.05),减缓趋势呈现出剂量差别,三个剂量的受试药物对瘤重抑制率分别为41.4%、46.7%、50.5%,瘤体积抑制率分别为38.1%、47.4%、54.3%,相对体积增值率分别为45.5%、55.2%、65.5%。不仅如此,实验组小鼠血浆内GM-CSF的表达量明显高于空白对照组,同时高剂量组GM-CSF的表达水平较另外两个药物组更高。实验期间小鼠体重平稳增加,于实验后期药物组小鼠体重增长速度较空白对照组稍慢,全组小鼠实验期间无死亡。[结论]1.我们的实验首次提供了重组鼠源GM-CSF单纯疱疹病毒(HSVGM-CSF)注射液在体外对小鼠胰腺癌细胞生长有抑制作用的证据。2.受试物重组鼠源GM-CSF单纯疱疹病毒注射液对小鼠胰腺癌PANC-2小鼠移植瘤具有良好的抑制作用,并体现出剂量依赖性；GM-CSF的大量表达可能是这种基因治疗药物治疗小鼠胰腺癌移植瘤的主要机制。3.实验期间给药组动物体重未出现明显的下降,未见动物死亡,提示受试物对小鼠毒性较小。综上所述,重组GM-CSF单纯疱疹病毒注射液可能成为一种治疗胰腺癌的新选择。