多基源贝母类药材的资源学研究

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贝母是历史悠久的传统中药,早在《神农本草经》就有记载,列为中品。随着后世中医药的不断发展,对贝母的认识不断加深,贝母类药材的基源不断扩大。《中华人民共和国药典2010版一部》2010版收录了5种贝母类药材,基源共包括11种贝母属植物。由于贝母的价格较高,目前药材市场上贝母的来源比较混乱,许多非药典规定的贝母属植物的鳞茎也充当贝母入药。同时,我国贝母属植物物种分类也存在着一定的分歧,《中国植物志》(1980年)记载我国有20种2变种,但其后发表于文献的贝母种及变种已经超过100个,《Flora of China》(2000年)对其进行了大量的归并,最终记载我国有24种2变种。本文试图通过植物形态性状、微形态、分子系统学等三个方面对部分贝母类药材基源植物的亲缘关系进行研究,以厘清基源物种的分类地位与系统发育关系,为药材基源的准确鉴定提供基础数据,同时,我们也探讨了贝母类药材混用情况及目前资源现状。本研究通过文献调研和实地调查两部分相结合对浙贝母(Fritillaria thunbergii)的资源情况进行了全面的调查。文献调研中查阅相关的历代本草,植物志书,地方县志,地方的标本馆,数字标本馆等相关文献以及相关的专业数据库,对浙贝的药用历史、资源分布状况、化学成分、药理作用等进行了整理。发现浙贝的药用历史最为久远,南朝《本草经集注》中记载的贝母便是现在的浙贝母。并于此基础上安排实地调查的样地与路线。实地调查中,通过采访药农、药商、制药企业、相关的地方管理部门或机构,以及实地的样方考察,全面了解浙贝母的栽培面积、栽培措施、生产量、销售量等资源情况。对长江中下游贝母群的叶表皮细胞、叶表面蜡质纹饰、气孔、叶横切面、鳞茎粉末进行观察与分析,发现湖北贝母(Fritillaria hupehensis)叶表皮细胞垂周壁、淀粉粒层纹等特征与其它贝母种有一定的差异;鄂北贝母(Fritillaria ebeiensis)的叶表皮细胞形状与垂周壁明显不同于安徽贝母(Fritillaria anhuiensis);蒲圻贝母(Fritillaria puqiensis)叶表皮细胞垂周壁与湖北贝母相近;安徽贝母(F. anhuiensis)、天目贝母(Fritillaria monantha)、浙贝母(F. thunbergii)在叶表皮细胞、淀粉粒、晶体等特征上都较为相近;川贝母(Fritillaria cirrhosa)叶表面的蜡质纹饰明显密集不同于长江中下游贝母群;伊贝母(Fritillaria pallidiflora)、平贝母(Fritillaria ussuriensis)鳞茎中的晶体明显不同于长江中下游贝母群。运用分支分类学的方法,收集28个植物性状采用最大简约法,对长江中下游贝母群构建最简一致树,结果得到最简一致树一颗。一致树上,浙贝母的距离最远,即从形态上来看,浙贝母(F. thunbergii)与其它几种贝母差异最大;其次为湖北贝母,湖北贝母(F. hupehensis)不同居群的样品聚在一起,形成一支;安徽贝母(F.anhuiensis)、天目贝母(F. monantha)两者的不同居群的样品聚在一起,无分辨率。从形态上,湖北贝母(F. hupehensis)与天目贝母(F. monantha)相近,但有明显且稳定的性状差异:前者花梗较短1-2cm,苞片卷曲,叶多3-7轮生。运用分子系统学的方法,采用ITS、matK、rpll6三个片段联合对长江中下游贝母群植物构建MP和NJ系统发育树。结果发现,长江中下游贝母群植物中鄂北贝母(F. ebeiensis)首先从这一类群中分支出来,其次为湖北贝母(F hupehensis),其次为蒲圻贝母(F. puqiensis),安徽贝母(F. anhuiensis)、浙贝母(F. thunbergii)、天目贝母(F. monantha)三者各自不同样地样品聚成一支,然后聚成一个大支,三者之间的亲缘关系应该最近。采用ITS对五种贝母类药材的基源植物构建MP和NJ系统发育树。结果表明,川贝母、伊贝母、平贝母三种贝母类药材的基源植物各自聚成一支,三者中川贝母与长江中下游贝母群植物关系最近。综上所述,本文从形态性状、微形态、分子系统学三个方面对贝母类药材的基源植物进行了亲缘学研究,结果发现湖北贝母(F. hupehensis)与天目贝母(Fmonantha)、鄂北贝母(F ebeiensis)与安徽贝母(F. anhuiensis)、川贝母(F. cirrhosa)与安徽贝母(F. anhuiensis)及平贝母(F. ussuriensis)等亲缘关系都较远,因此本实验的结果不支持《Flora of China》的观点,即将湖北贝母(F. hupehensis)归并于天目贝母(F.monantha),将鄂北贝母(F. ebeiensis)归并于安徽贝母(F. anhuiensis)的观点。本研究结果中各种贝母类药材的亲缘关系,也进一步表明,不同贝母类药材之间可能存在较大的差异,在应用中应厘清基源,不能混淆使用。
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