人参皂苷Rg3长循环脂质体的制备及评价

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目的人参皂苷Rg3(G-Rg3)是从人参茎叶中提取出的微量有效成分,临床实验表明G-Rg3抗肿瘤作用明显,具有抑制肝癌、肺癌、胃癌等癌细胞增殖、浸润和转移的作用,且能够改善机体心血管功能,增强免疫力。本文通过将G-Rg3制成长循环脂质体,延长药物体内作用时间,改善其生物利用度。方法本研究选用薄膜分散法制备G-Rg3长循环脂质体,首先通过单因素考察确定孵化温度、水化温度和PBS的pH。随后利用Box-Behnken Design软件建立三因素三水平的实验设计,以磷脂和胆固醇的比例(A),DSPE-PEG2000的浓度(B),磷脂和G-Rg3的比例(C)为考察因素,以包封率(EE)、载药量(EQ)和综合指标(OD)作为评价指标,优化G-Rg3长循环脂质体处方,对最佳处方条件下制得的脂质体的包封率、载药量、粒径、Zeta电位及体外累计释放度进行了测定。采用冷冻干燥法将G-Rg3长循环脂质体制成冻干粉,并对冷冻干燥保护剂进行了筛选。以SD大鼠为实验动物,尾静脉注射给药,进行G-Rg3长循环脂质体的药代动力学研究。结果采用薄膜分散法制备G-Rg3长循环脂质体的最佳处方为磷脂(30 mg):胆固醇=14:1,磷脂:G-Rg3=8:1,DSPE-PEG2000 浓度为 5%;在孵化温度为 60℃,水化温度为40℃,PBS的pH为7.4的工艺条件下制备的长循环脂质体为规则的球形,大小均匀,无黏连,平均粒径为44.57±1.37nm,Zeta电位为-26.45±1.49 mv;包封率为85.24±1.02%,载药量为7.44±0.08%;冻干工艺考察结果显示冻干保护剂选择2%乳糖时,冻干效果最佳;体外累计释放度实验表明G-Rg3长循环脂质体与G-Rg3普通脂质体相比,具有明显的缓释特征;药代动力学研究结果显示G-Rg3长循环脂质体组的Cmax、AUC、t1/2、MRT(19.70 μg·mL-1、17.04μg·h·mL-1、1.68 h、2.32 h)高于 G-Rg3 普通脂质体组(13.96μg·mL-1、10.40μg·h·mL/1、1.53 h、2.09 h)和 G-Rg3溶液组(5.21 μg mL-1、4.81 μg·h mL-1、1.12 h、1.43 h)。而三组的 CL 依次为(532.27 h-1 Kg-1、839.36 h-1·Kg-1、1190.09 h-1·Kg-1)。结论采用薄膜分散法制备G-Rg3长循环脂质体,制备工艺简单可行,制得的脂质体粒径小,分布均匀,包封率高,可延长作用时间,从而提高药物生物利用度,为G-Rg3的研究应用提供实验数据。
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