体外条件下绿色木霉的生物学及抑菌特性的研究

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绿色木霉(T.viride)是一类分布广泛的土壤习居菌,常见于植物残体及动物粪便上。除个别为弱病原菌外,大多数对果蔬病菌具有拮抗作用。由于绿色木霉的广泛适应性、拮抗多样性和寄生广谱性,因此它是一种很有潜力的生防菌。本文首先研究了绿色木霉的生物学特性、拮抗特性;发酵条件,结果表明:孢子萌发率在60小时内达到92.1%;生长曲线:适应期1.5d,对数增长期1.5-3.5d,平衡期3.5-6d,衰亡期6-8d;在基本培养基上生长最快;温度对菌丝生长和孢子产生影响显著,在pH2-11范围内均可生长,在pH 5-6时菌丝生长最快,pH值为7时孢子产生量最大;光照处理对菌丝生长影响不明显,但可明显促进孢子产生;葡萄糖和麦芽糖为菌丝生长和产孢子的最佳碳源;天冬酰胺是菌丝生长和孢子产生的最佳氮源;不同维生素对菌丝生长和孢子产生作用不同;微量元素对菌丝生长有一定的促进作用,Mn+2最有利于孢子产生。利用本实验室分离的十种病原菌研究绿色木霉广谱拮抗性,发现除了匍枝根霉和木瓜炭疽不显著外,绿色木霉对其他病原菌都达到显著抑制。利用绿色木霉代谢物对上述达到抑制显著的八种病原菌进行拮抗试验,来确定重寄生和分泌物两种抑菌方式哪个是主要的。发现只有黑曲霉和荔枝炭疽是代谢物抑制,并且抑制效果达到显著,其它都不显著。为进一步探求抑菌机理,通过透射电镜观察黑曲霉和荔枝炭疽发现黑曲霉和荔枝炭疽菌丝经绿色木霉代谢物处理后菌丝内部均发生细胞学变化。最后通过液体发酵和发酵液的成分初步分析,最佳培养基为麦麸皮4.5%、苹果渣2.0%、香蕉皮2.0%、KH2PO4 0.30‰、MgSO4 0.18‰、CaCO3 0.5‰、NaNO3 2‰;最佳培养条件是:温度28-20-30℃,搅拌速度125 r/min,pH 6,时间4天,接种量8%。
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