NDE1（Nuclear distribution protein nud E homolog 1）是动力蛋白Dynein的重要调节蛋白之一,与严重的人无脑回小头症（extreme microcephaly with lissencephaly）有关。NDE1通过调控Dynein的亚细胞定位,参与了细胞器定位、有丝分裂和纤毛发生等生理过程。Nde1敲除小鼠的皮质神经前体细胞会产生纺锤体组织紊乱和有丝分裂进程延迟的现象,但具体的机制尚不明确。在本文中,我们使用sh RNA降低He La细胞NDE1蛋白的表达水平后,通过免疫印迹、流式细胞术以及免疫荧光等方法,发现细胞增殖活力无明显变化,但有丝分裂发生异常,多数细胞被阻滞于前中期,无法形成正常纺锤体。我们将细胞同步化后释放,发现NDE1蛋白水平降低会导致有丝分裂指标蛋白的产生时间延迟,细胞进入有丝分裂受到阻碍。除此之外,我们还观察到NDE1蛋白在细胞有丝分裂时期产生电泳迁移速率减慢的现象。通过细胞总蛋白去磷酸化实验和使用不同细胞周期相关激酶抑制剂处理有丝分裂时期的细胞,我们证实该现象的产生是NDE1在有丝分裂时期发生磷酸化导致的,并且CDK1（Cyclin-dependent kinase 1）是磷酸化NDE1的主要激酶。PLK1（Polo-like kinase 1）是在细胞有丝分裂时期高表达的一种丝苏氨酸激酶,具有促进细胞有丝分裂进入、中心体分离以及动粒-微管连接等广泛而重要的功能。PLK1倾向于结合被CDK1预磷酸化的蛋白,并且在有丝分裂中定位于中心体、动粒和中央纺锤体等区域,与NDE1具有相似的亚细胞定位。我们通过Pulldown和免疫共沉淀实验证实,NDE1是PLK1的一种结合蛋白,并且CDK1对NDE1的磷酸化能够促进NDE1与PLK1结合。体外激酶实验的结果提示NDE1是PLK1潜在的磷酸化底物。此外,通过免疫共沉淀实验我们还发现微管结合蛋白Fam190b与NDE1也存在相互作用。综上所述,我们的研究发现了NDE1是一种新的PLK1结合蛋白和磷酸化底物,为进一步研究NDE1与PLK1的相互作用在细胞有丝分裂中发挥的功能奠定了工作基础,为理解细胞有丝分裂的具体机制提供了一种新的思路。