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【目的】构建含GILZ蛋白基因的质粒，转染至人单核细胞白血病细胞(THP-1细胞)，培育建系。研究GILZ，转录因子(NF-κB和AP-1)，炎症因子(TNF-α、IL-1β及TL-10)在脂多糖刺激的普通THP-1细胞和GILZ基因转染的THP-1细胞中的表达情况及它们之间的关系，探讨GILZ在炎症反应过程中的可能作用及其机理。【方法】用无血清的RPMI-1640培养基培养THP-1细胞，提取总RNA，扩增GILZ基因编码区，将其连接至pMD19-T载体后，热转化至感受态细胞E．coliJM109中，于LB／Amp／X-Gal／IPTG平板培养基培养，筛选合格菌落，提取质粒测序确认。使用EcoRⅠ／HindⅢ酶切上述质粒后纯化，与经EcoRⅠ／HindⅢ酶切后纯化的pcDNA3.1(+)载体连接，然后将连接后载体热转化至感受态细胞E．coliDH5α中，扩增菌体，挑选菌落提取质粒，用EcoRⅠ／HindⅢ酶切，电泳后确认目的质粒，对相应菌落进行扩增。部分保存，部分提取质粒，将提取质粒用质子体法转染至THP-1细胞中，筛选后培养，建立稳定转染细胞系。将不含有血清的RPMI-1640培养基培养普通THP-1细胞，分为A组和B组；将不含有血清的RPMI-1640培养基培养GILZ质粒转染的THP-1细胞分为C组和D组，调节A、B、C、D各组细胞浓度体积相同。向B、C组加入1g／ml的LPS，调整终浓度至500ng／ml，向A、D组加入等量不含有血清的RPMI 1640培养基，培养12h后提取各组细胞总RNA、总蛋白以及培养液上清，运用半定量RT-PCR方法检测各组GILZ基因；运用Western Blotting检测各组NF-κB、AP-1的c-Fos亚单位，用ELISA法检测各组TNF-α、IL-1β以及IL-10的表达。【结果】A、B、C、和D组GILZ mRNA与β-actin光密度比值依次为：0.5728±0.0019、0.4856±0.0025、0.6878±0.0023、0.7158±0.0033，组间差异有统计学意义(P＜0.05)。A、B、C、和D组NF-κB p65蛋白的灰度值与GAPDH灰度比值依次为：0.2607±0.0014、0.6991±0.0024、0.3693±0.0046、0.1580±0.0027，组间差异有统计学意义(P＜0.05)。A、B、C、和D组c-Fos亚单位的灰度值与GAPDH灰度比值依次为：0.2295±0.0004、0.5799±0.0005、0.3625±0.0007、0.1088±0.0010，组间差异有统计学意义(P＜0.05)。A、B、C、和D组TNF-α的浓度(pg／ml)依次为：32.86±0.48、98.49±0.84、68.76±0.35、17.76±0.71，组间差异有统计学意义(P＜0.05)。A、B、C、和D组IL-1的浓度(pg／ml)依次为：56.80±0.42、85.43±1.98、43.26±1.46、27.03±0.22，组间差异有统计学意义(P＜0.05)。A、B、C、和D组IL-10的浓度(pg／ml)依次为：53.52±0.60、32.82±0.11、65.76±0.58、88.07±0.2，组间差异有统计学意义(P＜0.05)。以上数据显示：LPS刺激未转染组(B组)和转染组(C组)分别较无LPS刺激组未转染组(A组)和转染组(D组)GILZmRNA表达水平低，差异具有统计学意义(P＜0.05)；LPS刺激时GILZ mRNA表达水平越高(C组)，NF-κB p65与AP-1蛋白c-Fos亚单位表达水平越低(B组)，差异有统计学意义(P＜0.05)。【结论】GILZ在LPS刺激时表达下调；GILZ对NF-κB与AP-1有抑制作用，LPS刺激是GILZ的表达降低，结果对转录因子NF-κB与AP-1的抑制作用减弱，导致炎症反应的增强，GILZ在炎症反应过程中起重要作用。