四翅滨藜乙烯响应转录因子AcERF1功能解析

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植物从种子萌发、幼苗形成、生长发育到开花结果时刻面临着各种病原菌和不利环境的威胁,并且每个阶段的灾害都有可能造成严重的损失。据统计由于病原菌侵染使植物遭受病害导致植物减产的平均损失大概占总产量的10%-20%,全世界因此造成的经济损失每年平均高达2000亿美元,而因恶劣环境因子导致全球每年高达80%的耕地遭受逆境的胁迫。四翅滨藜因其耐旱、耐盐碱、抗低温和对重金属Pb、Ni等有较强吸附能力和耐受力而成为荒漠、半荒漠和矿区的生物修复树种。本研究从多抗灌木四翅滨藜中克隆得到一个编码ERF转录因子的基因,即AcERF1,对其进行了结构分析和生物功能鉴定,主要研究结果如下:1.本研究从多抗植物四翅滨藜cDNA文库EST测序获得一个编码四翅滨藜ERF类转录因子的全长cDNA序列,命名为AcERF1(登录号:JN984931),该转录因子含有一个典型AP2功能域,与拟南芥ERF家族中Group VI成员的同源为20%,而与同属植物华北驼绒藜CeERF1的同源性高达75%;2.测定不同胁迫条件下酵母生长曲线和比较高浓度胁迫剂胁迫后酵母细胞的存活率表明在酵母中表达AcERF1基因显著增强了酵母细胞对KCl、山梨醇和百草枯(模拟活性氧胁迫)的抗性,同时对高温和NaHCO3也有抗性应答,初步推断AcERF1参与植物对干旱、高盐等逆境胁迫应答;3.将AcERF1与GFP融合后在烟草中瞬时表达进行定位并在酵母单杂系统中分析其转录激活能力的结果表明AcERF1是定位在细胞核上的转录激活子;4. qRT-PCR分析结果表明干旱、高盐、低温和碱诱导AcERF1表达上调,外源施加乙烯AcERF1表达量迅速上升百倍而水杨酸、脱落酸和茉莉酸处理均在不同程度上诱导AcERF1表达;5. AcERF1基因通过上调抗病相关基因PR1、PR2、PR5、 PR4、PR8、 Pdf1.2及抗病转录因子基因ERF1、ERF3的表达增强了转AcERF1基因拟南芥对半寄生性细菌病原菌PstDC3000和腐生寄生性病原真菌番茄灰霉病菌的抗性;6. AcERF1基因过表达株系对外源ABA表现出超敏感表型且其气孔开闭过程也对ABA过敏感,同时过表达株系也增强了对干旱胁迫的抗性,干旱条件下转基因株系体内编码ROS消除酶系的基因、抗逆蛋白胚胎发育晚期蛋白的基因和抗逆调控转录因子的表达量上调,增强了植物细胞内ROS消除酶酶活和渗透调节物质的含量从而减少细胞内活性氧物质对细胞的损害,同时植物叶片气孔关闭降低水分蒸发进而增强转AcERF1基因拟南芥对干旱的抗性。
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