水蛭提取液对P38丝裂原活化蛋白激酶介导的人视网膜色素上皮细胞跨膜信号转导途径的影响

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目的研究水蛭提取液对P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 mitogen activated proteinkinase,P38MAPK)介导的人视网膜色素上皮细胞(hRPE)跨膜信号转导途径的影响。方法(1)购买原代人视网膜色素上皮细胞,复苏后进行体外传代培养。(2)根据前期实验数据,选择0.5NIHU/ml的凝血酶作为诱导浓度,64mg/ml的水蛭提取液作为药物浓度;水蛭提取液与凝血酶分别(或共同)孵育hRPE30分钟后,采用流式细胞术及免疫细胞化学方法检测孵育hRPE细胞内P38MAPK的表达。结果(1)根据各组的P38MAPK流式荧光量比较发现凝血酶组(6.4417±0.072)与正常对照组(5.4567±0.1825)相比,荧光量升高,有显著性差异(P<0.01),水蛭提取液组(4.4483±0.2015)与正常对照组相比,荧光量下降,有显著性差异(P<0.01),合药组(4.1433±0.068)与凝血酶组相比,荧光量下降,有显著性差异(P<0.01)。(2)根据各组P38MAPK免疫细胞化学平均光密度值比较发现凝血酶组(1.195±0.0226)与正常对照组(1.055±0.0187)相比,OD值上升,有显著性差异(P<0.01),水蛭提取液组(0.7567±0.071)与正常对照组相比,OD值下降,有显著性差异(P<0.01),合药组(0.555±0.065)与凝血酶组相比,OD值下降,有显著性差异(P<0.01);结论水蛭提取液能抑制hRPE的增殖,其机制与P38MAPK介导的信号转导通路有关。
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