人头皮裂创愈复过程中caspase-10和泛素表达的法医学研究

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1.研究目的: 损伤时间推断(dating of wound)是指用形态学或其它检测枝术推测损伤形成的时间。准确推断损伤时间,在为侦察工作提供线索、划定侦察范围、确定犯罪嫌疑人有无作案时间等方面或在确认案件性质、阐明作案过程均有重要意义。但至今尚未找到一种精确推断损伤时间的方法。因此,损伤时间推断成为国内外法医学领域研究的重要课题之一。 本实验通过观察交通损伤致人头皮裂创的创口愈复过程的形态学变化,结合利用图像分析系统进行量化指标测定,探讨选定指标对于损伤时间推断的法医学意义,为日常法医学检案提供理论依据和相关实验指标。 2.研究方法: 本实验共收集交通损伤死亡者基本资料128例,选取其中35例经过不同时间段死亡的死者头皮裂创,分为七组,其中交通损伤后立即死亡的5例作为对照组,其他按损伤时间的不同分为六组。 2.1交通损伤死亡者流行病学分析:通过对交通损伤死亡者基本资料的整理和分析,描述易发生交通事故的群体特征。 2.2形态学观察:对所收集的标本均进行HE染色、caspase-10和泛素的免疫组化染色观察;采用图像分析系统对细胞形态、免疫组化指标进行量化指标测定。 2.3分析相关数据,总结规律,得出结论。 3.研究结果: 3.1交通损伤致颅脑损伤死亡者流行病资料分析: 128例中男性占84例,女性占44例,男女比例1.91:1;年龄分布于15岁~76岁,其中85%分布于19岁~43岁间,71%分布于21~34岁;97例死者为进城务工人员,占总数的76%。 3.2HE染色结果实验组中,损伤区见炎症细胞浸润,中性粒细胞、单核细胞增生明显,正常组织结构崩解;超过48小时组多数见肉芽组织形成,成纤维细胞增生,大于9天组炎症细胞基本消失。 3.3免疫组化染色结果1)caspase-10:对照组和实验组标本中表皮基底细胞层、棘细胞层、颗粒细胞层以及真皮层皮脂腺和汗腺上皮细胞均表达阳性,但实验组阳性较对照组增强;伤后0.5~6h,caspase-10在结缔组织区少许表达,伤后6~24h,caspase-10开始出现较多量表达;伤后24~72h,caspase-10表达明显,伤后4~5d,caspase-10表达最为明显,损伤愈复区特别是肉眼组织表达明显;对照组与0.5~6h组比较无统计学意义;对照组和其他实验组比较具有统计学意义(P<0.05),实验各组比较均具有统计学意义(P<0.05)。 2)泛素:ubiquitin在对照组的表皮层和毛囊、皮脂腺呈弱阳性染色。伤后6h~24h,ubiquitin表达比较明显,伤后24~72hubiquitin在结缔组织表达明显;伤后4~5d,ubiquitin在逐渐形成的肉芽组织中呈广泛阳性染色,此时ubiquitin阳性率最高。伤后7d以上,ubiquitin阳性染色逐渐减弱。对照组与0.5~6h组比较无统计学意义;对照组和其他实验组比较具有统计学意义(P<0.05),实验各组比较均具有统计学意义(P<0.05)。 4.研究结论: 1)交通事故致死多见于职业劳动者,青壮年男性是交通事故致死的高危人群。 2)HE染色和免疫组化染色结果分析表明头皮裂创区在愈复过程中存在明显形态学改变;头皮裂创愈复过程导致细胞凋亡加速,细胞凋亡相关因子caspase-10和ubiquitin的表达随着愈复过程的进展呈规律性变化,其在相应时间段表达具有明显差异性。 3)本研究为交通事故的预防和损伤时间的推断提供科学依据。
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