戊型肝炎病毒感染患者Th1/Th2细胞变化的研究

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目的:1.研究戊型肝炎病毒感染患者起病后的Th1/Th2细胞的变化,初步探讨HE患者的细胞免疫反应。2.研究戊型肝炎病毒感染患者的Th1/Th2细胞变化与病毒本身之间的联系,进一步了解戊型肝炎患者肝细胞损伤的机制。方法:1.收集2010年06月-2011年6月来我院感染科门诊部及住院部的戊型肝炎患者抗凝血及血清30份。并收集患者一般生化指标,主要是ALT、TBil。2.分离HE患者及对照组的抗凝血中的PBMCs,经重组ORF2蛋白特异性刺激并体外培养6小时后,采用流式细胞术检测外周血中Th1/Th2细胞的百分率含量。3.采用相对定量实时荧光聚合酶链式反应检测30份血清的病毒相对定量。结果:1.30例HE患者和15例对照PBMCs经特异性刺激原刺激后,Th1细胞百分率分别为22.07%±8.45%、5.65%±2.83%,HE组Th1细胞显著高于对照组,而Th2细胞百分率分别为2.12±0.85%,2.5%±1.25%,两者差异无统计学意义。2.30例患者血清样本中检出HEV RNA阳性8例,根据HEV RNA检出与否分为HEV RNA阳性组和阴性组,HEV RNA阳性组PBMC中Th1细胞、Th2细胞百分率分别为25.50%±8.72%、2.17±1.02%,而HEV RNA阴性组经rORF2p刺激后PBMC中Th1细胞、Th2细胞百分率分别为20.82%±8.23%,1.98%±0.75%,HEV RNA阳性组与阴性组中PBMC中Th1细胞、Th2细胞百分率差异均无统计学意义。3. HEV RNA阳性组与阴性组起病时间分别为6.9±4.0天,17.3±10.1天,表明HEV患者病毒血症时间短,显著低于其疾病的症状期。4. HEV RNA阳性组与阴性组的TBil为110.4±69.1umol/L,225.7±126.1umol/L,HEV RNA阳性组显著低于HEV阴性组;而两者ALT的波动范围是879-2922U/L,48-5282U/L,HEV阳性组低于HEV阴性组。结论:1. HEV感染机体后,可引起宿主细胞免疫增强,表现为分泌IFN-γ的Th1细胞反应性增多,考虑Th1细胞参与了HEV的感染与清除。但HEV完全被清除后,Th1细胞在PBMCs中的含量仍未明显下降,可能HEV清除后机体是否仍有免疫原性物质。2. HEV完全被清除体外后,肝细胞仍有进一步损伤,推测可能HEV被清除后,机体因免疫状态失衡继续出现肝细胞损害。
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