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目的研究肿瘤干细胞表面标志物CD44和人胚胎干细胞的标志物Oct4在人结直肠腺癌组织中及人结肠癌细胞系SW620和SW480中的表达及意义；观察对比CD44+/Oct4+细胞在正常肠黏膜、腺瘤、结直肠腺癌组织和人结肠癌细胞系(SW620/SW480)中的数量、分布方式及细胞形态特征,探讨其作为结直肠腺癌肿瘤干细胞标志物的潜在价值。方法利用组织芯片技术、免疫组织化学染色及免疫组织化学双重染色技术,标记定位结直肠腺癌(108例)、腺瘤(18例)、正常肠黏膜组织(18例)和人结肠癌细胞系SW620、SW480中CD44+细胞、Oct4+细胞及CD44+/Oct4+细胞,观察计数并对比其在不同组织、不同细胞系中的数量、分布方式、细胞形态特征以及与临床病理参数间的关系。采用IBM SPSS20.0统计软件包进行统计学处理,计数资料用χ2检验,等级分组资料用Spearman等级相关分析,两组间均数的比较采用两独立样本的t检验,多组间均数的比较采用单因素方差分析,P<0.05差异有统计学意义。结果1、CD44和Oct4在正常肠黏膜、腺瘤及腺癌中的阳性表达率分别为16.67%(3/18)和5.56%(1/18),44.44%(8/18)和33.33%(6/18),80.19%(85/106)和65.09%(69/106),组间差异均有统计学意义(P<0.05)。二者的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移及Dukes分期均有关,差异有统计学意义(P<0.05),CD44表达还与肿瘤浸润深度有关,差异有统计学意义(P<0.05)；经Spearman等级相关分析,CD44和Oct4的表达与病变程度、Dukes分期呈正相关(r值分别为0.486,和0.417,0.387和0.272,P值均<0.01),与肿瘤分化程度呈负相关(r值为-0.262,-0.365,P值均<0.01)。二者的表达呈正相关(r=0.438,P<0.01)。2、正常肠黏膜中未见CD44+/Oct4+细胞,腺瘤及腺癌中CD44+/Oct4+细胞数量的平均值为0.51%(0%-3.12%)和7.05%(0%-23.15%),经两独立样本的t检验比较,差异有统计学意义(t’=-9.832,P<0.05)。CD44+/Oct4+细胞数量的平均值在高、中、低分化腺癌组织中分别为3.17%(0%-16.38%)、5.37%(0%-17.54%)和12.67%(2.31%-23.15%),经单因素方差分析,三者均数间存在差异(F=27.391,P<0.05)。在腺癌组织中CD44+/Oct4+细胞胞浆稀少,胞核相对较小呈圆形或卵圆形,均质深染,形似淋巴细胞,主要沿腺管样结构基底膜侧或共壁腺体的共壁侧呈小灶状或散在点状分布。3、在结直肠腺癌组织中,CD44+/Oct4+细胞数量与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、大体类型和肿瘤大小无明显关系,差异均无统计学意义(P>0.05),与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及Dukes分期有关,差异有统计学意义(P<0.05)。经Spearman等级相关分析,CD44+/Oct4+细胞的数量与组织病变程度、改良Dukes分期呈正相关(r值分别为0.644和0.396,P值均<0.01),与肿瘤分化程度呈负相关(r=-0.579,P<0.01)。4、在人结肠癌细胞系SW620及SW480中CD44+/Oct4+细胞主要为小圆形细胞和单极细胞,其数量的平均值分别为8.18%(6.13%-9.76%)和7.25%(4.56%-9.76%),较接近实体瘤中双阳性细胞数量的平均值(7.05%)。经两独立样本的t检验比较,差异无统计学意义(t’值分别为-1.471和-0.227,P>0.05)。结论1、CD44+/Oct4+细胞在结直肠腺癌组织中的数量与反映肿瘤恶性程度及预后的临床病理参数密切相关,可作为评估结直肠腺癌生物学行为、判断预后的依据之一,为临床治疗提供参考。2、CD44+/Oct4+细胞在人结肠癌细胞系SW620及SW480中的数量及形态特征与实体瘤中标记的细胞相似,从细胞水平进一步论证CD44+/Oct4+表型细胞作为结直肠腺癌肿瘤干细胞的可行性,可作为进一步分离、鉴定结直肠腺癌肿瘤干细胞的前期实验依据。3、CD44+/Oct4+细胞在癌组织中的数量极少,形态及分布特征与肠黏膜隐窝底部正常干细胞相似,处于较原始的状态。CD44+/Oct4+免疫表型可能是结直肠腺癌肿瘤干细胞有价值的潜在标志物,可作为预测肿瘤复发、转移和判断预后的可靠指标,有望成为未来结直肠腺癌肿瘤干细胞靶向治疗的治疗靶点。