N6-甲基腺嘌呤(]m6A)是一种重要的RNA的修饰形式,它存在于核糖体RNA(rRNA)、转运RNA (tRNA)、信使RNA (mRNA)及非编码RNA (ncRNA)上,m6A是真核生物mRNA上分布最为广泛的甲基化修饰,它的形成可能调节转录后的一系列过程,如pre-mRNA的剪接、转运、降解以及翻译等,m6A的形成是由一个巨大的甲基转移酶复合体催化形成的,该复合体由MT-A(约2OOkDa)和MT-B(约800kDa)两部分组成, METTL3(methltransferase like3)是MT-A中唯一被鉴定的组分,同时m6A去甲基化酶FTO和ALKBH5的发现使得m6A成为RNA上第一个可逆的甲基化修饰,m6A在甲基转移酶和去甲基化酶协同作用下的动态变化进一步说明了m6A可能在生命活动中起到重要的调节作用。另外,研究发现,肿瘤发生的不同时期转移细胞中的m6A的甲基转移酶的含量高于非转移细胞暗示了m6A的水平与癌症之间的关联。此外有研究发现METTL3在胚胎的不同时期的表达也是不同的,暗示了m6A对于发育也起着某些重要的作用。但是,m6A甲基转移酶复合体中的其他组分仍然未知,METTL3是通过和哪些蛋白的相互作用,调节哪些基因的m6A水平来调节生命活动的机制也尚不清楚。本研究首先通过体外纯化His标签的METTL3融合蛋白制作了可以应用于蛋白免疫沉淀和蛋白免疫印迹的METTL3的特异性抗体,之后通过串联亲和纯化和质谱分析结合的方法筛选出WTAP是METTL3的潜在互作蛋白,并在真核及原核细胞蛋白水平上分别利用免疫共沉淀和体外GST pull-down两种方法证明了WTAP和METTL3是相互作用的；此外,细胞水平上,METTL3与WTAP均与nuclear speckle标志蛋白共定位,且METTL3在nuclear speckle中的定位受WTAP的影响,进一步证明了二者之间相互作用关系。METTL3互作蛋白WTAP的发现为探索METTL3甲基转移酶如何通过调节靶基因的m6A水平实现其相关的生物学功能,揭示其生物学机制提供了更多的理论基础。