基于信号放大新策略的电化学发光免疫传感及其在食品和环境安全中的应用

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随着国民经济的增长,人民对美好生活的需求日益提升,“健康”成为人们追求的重点,食品和环境安全问题越来越受到关注。为了能够简单又快速地检测出食品和环境中痕量的污染物,发展一种高灵敏度的分析检测方法势在必行。电化学发光(ECL)免疫传感器是以电化学发光和免疫分析方法为基础,建立的一种可以快速、灵敏检测目标物的生物传感器。为了提高该分析方法的灵敏度,将信号放大技术应用于传感器的构建。由于纳米材料独特的光学、电学和催化性质,它不仅可以用作生化反应和信号聚集的载体,还可以作为模拟酶进行催化反应,在提高电子转移速率的同时还能增大信号分子的负载。所以,近年来,基于纳米材料信号放大策略的电化学发光免疫分析方法(ECLIAs)已经成为分析检测领域中的一大研究热点。在此基础上,本论文合成了 PEDOT官能化的氧化石墨烯(GO/PEDOT)、金纳米棒(AuNRs)、钯-金核壳纳米晶(Pd/Au CSNs)、金纳米棒负载的氧化石墨烯(GNRs/GO)、钯-铂纳米树突(Pt/Pd NDs)等一系列纳米复合材料,运用于传感器的构建。基于功能化纳米材料的信号放大方式,发展了一系列在食品和环境安全中目标物检测的信号放大新策略,提高传感器分析和检测的性能,为今后开发新的分析方法提供强有力的理论和实验支持,为食品和环境安全的研究和应用提供了有效的分析方法。本论文主要包括以下几个部分:一、以QDs-PEI-GO/PEDOT为载体实现信号放大,构建了一种新型ECL免疫传感器检测双氯芬酸钠(DCF)。电极部分采用AuNRs改性,通过Au-N键将大量的DCF包被抗原固定在电极上。所制备的抗DCF多克隆抗体(pAb)对DCF具有高亲和力识别,大大提高了传感器的灵敏度和选择性。基于优化条件下,该免疫传感器在DCF检测中的检测限低至0.33 pg mL-1(S/N=3),并成功应用于实际水样的检测。二、以Pd/Au CSNs为信号放大探针,以GNRs/GO为电极修饰材料,构建了检测苏丹红Ⅰ号的超灵敏竞争型ECL免疫传感器。基于Pd/Au CSNs与GNRs/GO的双重信号放大作用,该免疫传感器对苏丹红Ⅰ号测定具有良好的稳定性、高的灵敏度和宽的线性响应范围,检测限为0.3 pgmL-1(S/N= 3),并且已成功地应用于实际样品中苏丹红Ⅰ号的测定。三、以Pt/Pd-TNG50作为信号增强剂,基于S2O82-/O2体系的竞争型ECLIAs测定Hg2+。分别利用Pt/Pd NDs和TN的催化效果和强π-π叠加协同作用对S2O82-/O2体系起到信号放大的效果。此外,抗Hg2+的单克隆抗体(mAb)对Hg2+的具有极高特异性,极大地提高了免疫传感器的特异性和灵敏性。结果表明,该免疫传感器在Hg2+检测中具有较低的检出限(16 pg mL-1,S/N=3)以及较高的灵敏度和稳定性。
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