双氢青蒿素对人食管癌细胞TE-13的体外作用及其机制的实验研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:odu38sbfsw
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:食管癌(esophagealcancer,EC)是人类常见的消化道恶性肿瘤之一,我国属于食管癌病发率较高的国家,近年来其发病率和病死率均逐年增高。目前食管癌的主要治疗模式是包括手术、化疗、放疗及生物治疗为主的综合治疗。因为该病早期症状不明显,缺乏特异性的表现,容易为忽视,很多患者确诊时已经属于中晚期,预后很差。因而寻求一种有效的治疗方法,对于改善食管癌患者的生活质量及延长生存时间有着十分重要的意义。近年来,国内外很多学者通过体内外实验研究发现青蒿素的衍生物双氢青蒿素(DHAdihydroartemisinin)具有显著的抗肿瘤作用,并且具备传统化疗药物治疗并不具备的一些优良的特点,因此作为一种具有广阔发展前景的抗癌治疗药物,日益引起广大学者的广泛关注,但目前国内外有关DHA对人食管癌的影响的文献报道较少见。本实验通过体外实验研究DHA对人食管癌细胞株TE-13的增殖抑制作用和对细胞周期和凋亡以及Survivin、Caspase-3蛋白表达的影响,进一步探讨DHA对人食管癌细胞株TE-13细胞的作用及其相关机制,从而为食管癌的中医中药治疗提供相应的理论依据。方法:1细胞培养后,应用普通光学显微镜观察DHA作用于人食管癌细胞株TE-13后细胞的形态学变化。2不同浓度的DHA作用于人食管癌TE-13细胞后,应用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)比色法测定细胞光密度值(opticaldensity,OD),计算生长抑制率,研究DHA对人食管癌细胞株TE-13细胞增殖的影响。3应用流式细胞仪技术(flow cytometry,FCM)研究DHA对人食管癌细胞株TE-13凋亡率的影响。4应用流式细胞技术检测DHA对人食管癌细胞TE-13细胞周期分布影响。5应用免疫细胞化学(immunocytochemistry,IC)方法定性检测DHA作用于人食管癌细胞TE-13后,凋亡相关基因Survivin、Caspase-3蛋白的表达变化。结果:1DHA对TE-13细胞形态的影响普通光学显微镜下观察未经药物处理的TE-13细胞贴壁生长,分布均匀,形态呈菱形或多边形,大小一致,细胞透明,形态饱满,胞体折光性好。而经过DHA处理48h后的实验组细胞形态发生明显的变化,细胞数目减少,体积缩小,细胞胞浆中出现空泡,细胞核固缩,脱落细胞数量明显增加,胞体折光性减弱。2DHA对TE-13细胞增殖的抑制作用MTT比色法显示,不同浓度DHA对TE-13细胞有明显的体外增殖抑制作用。给予不同浓度的DHA(10、20、40、80、160μmol/l)处理TE-13细胞24h、48h、72h显示,各加药组OD值均有不同程度下降,抑制率呈不同程度的升高,与对照组相比,差异具有统计学意义(p<0.05)。并且随着药物浓度的不断增加、作用时间的不断延长,OD值逐渐下降,抑制率逐渐升高。由此可见,DHA对TE-13细胞的增殖抑制作用呈现明显的剂量-时间效应关系。3DHA对TE-13细胞凋亡率的影响流式细胞仪检测细胞凋亡率结果显示,DHA可诱导TE-13细胞凋亡。给予浓度为40、80、160μmol/l的DHA作用于TE-13细胞48h后,出现典型的亚二倍体凋亡峰,随着DHA浓度增大呈明显的升高趋势,低、中、高剂量加药组的凋亡百分率分别为:8.643%±0.126%、18.606%±0.776%、29.026%±0.730%,统计后提示各处理组较对照组有显著性统计学意义(p<0.05)。4DHA对TE-13细胞周期分布的影响流式细胞仪检测细胞周期结果提示,DHA可阻滞TE-13细胞周期于G0/G1期,该作用在各加药组有明显的剂量依赖性。应用不同浓度DHA(40、80、160μmol/L)作用TE-13细胞48h后,随药物浓度增加,药物组与对照组相比,G0/G1期细胞呈增多趋势,G2/M及S期细胞呈减少趋势,统计提示较对照组及药物组均有统计学意义(P<0.05)。5免疫细胞化学检测DHA对TE-13细胞Survivin、Caspase-3蛋白表达的影响。免疫组化结果提示,DHA可以使Survivin表达减弱,Caspase-3蛋白表达升高。不同浓度DHA(40、80、160μmol/L)作用后,经阳性细胞百分比以及阳性细胞染色程度两方面分析,加药组Survivin蛋白表达值(IHS值)随药物浓度增加,逐渐降低,各加药组和对照组相比有显著性差异(p<0.01)。加药组Caspase-3的表达值(HIS值)随药物浓度增加,逐渐升高;各加药组和对照组相比有显著性差异(p<0.01)。结论:1MTT实验证实在一定浓度范围内,DHA具有抑制人食管癌细胞株TE-13增殖的作用,并呈现明显的剂量-时间依赖关系。2DHA可以诱导人前列腺癌TE-13细胞凋亡,使细胞停滞于G0/G1期,并在一定浓度范围内呈时间-剂量依赖性。3DHA抗食管癌作用机制可能与下调Survivin蛋白和上调Caspase-3蛋白表达水平有关。
其他文献
文章从参数估计和数据拟合的视角出发,对时间序列中两个经典的模型-ARMA模型和bilinear模型的特性进行比较,比较之后发现:对于线性结构的数据,ARMA模型与bilinear模型拟合准确度
玛扎塔格断裂带的演化过程对塔里木盆地巴楚隆起和麦盖提斜坡油气成藏有着重要的控制作用.根据最新地震资料的精细解释和构造解析,分析了玛扎塔格断裂带的变形结构、样式和变
为了实现工业微波加热器的智能控制,采用ADuC812单片机为核心处理器,结合FUZZY-PID算法设计了一套能够智能检测温度和调节微波输出功率的控制系统,其主要原理是通过单片机实现串
目的:探讨吸烟对慢性牙周炎患者牙周指数及龈沟液(GCF)中MCP-1、IL-8表达的影响。方法:纳入慢性牙周炎患者80例,其中吸烟与非吸烟患者各40例分别进行牙周基础治疗,于治疗前及
大数据信息集成处理已经逐渐成为国家治理能力和治理体系现代化的重要基础和战略保障。在当前脱贫攻坚工作进入关键时期的重要历史节点,将大数据的处理、运用与精准扶贫的实
人的性别之分两种:男人和女人,女人除了在原始时期占一个家庭的主要地位时,其他都属于依附地位。女人自有文字记载以来都是依附着男人而存在,她们或许靠男子而生存或许存在的
选用4种促释材料(W、Y、QW、FS)对磷矿粉、轻烧氧化镁混合物进行活化处理,配制促释材料含量分别为3%、5%的Ⅰ、Ⅱ型促释磷镁草花基质,通过淋溶试验、盆栽试验研究水溶性磷、
图像教学是初中地理教学的重要内容,图像能够帮助学生更好地理解地理知识,使教学内容更加直观.在图像教学中,教师首先应让学生明确地理图像的类型,并根据实际的教学需要,合理
<正> 目前,我国相当一部分中小城市的户外广告无序化状况严重,广告媒体设置混乱,视觉图像泛滥成灾,使得城市中这一道道“亮丽的风景线”反倒成了混乱不堪的“视觉垃圾”。户
随着中国商品经济的繁荣与发展、人民生活质量的提高以及消费水平的提高、生活节奏的加快,消费者对微波食品、休闲食品、冷冻食品等速食食品的需求量越来越大。业内人士指出,这
报纸