姜黄素对大肠杆菌攻毒仔猪生长性能及肠粘膜屏障功能的影响

来源 :海南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:suishi2001
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为探讨日粮中添加姜黄素对断奶仔猪生长性能、抗氧化性能、肠道机械屏障与免疫屏障的影响,和其替代抗生素应用于饲料添加剂的可行性,并探索适合的添加量。本试验选用50头21日龄断奶仔猪,随机分为5组,每组10个重复,每个重复1头猪。预试期采用大肠杆菌进行攻毒(1×109个细胞/头),其中对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加50mg/kg喹烯酮,200mg/kg、300mg/kg和400mg/kg姜黄素,试验期21d。1为探讨姜黄素对断奶仔猪生长性能和抗氧化性能的影响,实验检测了仔猪平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)及料重比(F/G),并对仔猪血清谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量进行检测,结果发现:与对照组相比,日粮中添加50mg/kg喹烯酮、300或400ng/kg姜黄素可以显著降低断奶仔猪的料重比(P<0.05);喹烯酮组GSH-PX、CAT、SOD活性显著升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05),300mg/kg和400mg/kg姜黄素组断奶仔猪血清中GSH-PX、CAT、SOD活性和T-AOC显著升高(P<0.05),400mg/kg姜黄素组MDA含量显著降低(P<0.05)。结果表明,日粮中添加喹烯酮、300mg/kg或400mg/kg姜黄素能促进仔猪生长,提高仔猪抗氧化性能。2为探讨姜黄素对仔猪肠粘膜机械屏障的影响,在光镜下测量空肠、回肠绒毛高度、宽度及隐窝深度,计算绒腺比,采用ELISA法测定DAO活性和D-乳酸的含量,采用免疫组化和荧光定量PCR技术测定了Claudin-1、Occludin和ZO-1mRNA及蛋白表达。结果表明:1)日粮中添加300mg/kg或400mg/kg姜黄素显著提高空肠和回肠绒毛高度(P<0.05)与绒腺比(P<0.05),降低绒毛宽度(P<0.05)和隐窝深度(P<0.05),喹烯酮组空肠与回肠绒毛宽度和空肠隐窝深度显著降低(P<0.05),绒腺比显著升高(P<0.05);2)300和400mg/kg姜黄素组可显著降低血浆中DAO活性(P<0.05)和D-乳酸含量(P<0.05),200mg/kg和喹烯酮组血浆DAO和D-乳酸与对照组差异不显著(P>0.05);3)300和400]mg/kg姜黄素组Occludin和ZO-1蛋白表达升高(P<0.05), Claudin-1蛋白表达无明显差异(P>0.05),喹烯酮和200mg/kg姜黄素组Claudin-1、Occludin和ZO-1蛋白表达量与对照组差异不显著(P>0.05);4)300mg/kg和400mg/kg姜黄素组Occludin和ZO-1mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),400mg/kg姜黄素组Claudin-1mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),200mg/kg姜黄素组ZO-1mRNA表达量显著高于对照组(P<0.05),喹烯酮组Claudin-1、Occludin和ZO-1mRNA相对表达量与对照组差异不显著(P>0.05),结果显示:日粮中添加300mg/kg或400mg/kg姜黄素可降低肠粘膜通透性,提高紧密连接蛋白及其mRNA表达,进而改善肠粘膜形态结构保护肠粘膜机械屏障。3为探讨姜黄素对仔猪肠粘膜免疫屏障的影响,试验采用PAS染色法统计空肠、回肠粘膜杯状细胞数,应用免疫组化法测定sIgA蛋白的表达,利用荧光定量PCR方法测定了空肠粘膜IL-1β、1L-6、 IL-10、 TNF-a和TLR4mRNA的相对表达量。结果显示:日粮中添加300mg/kg或400mg/kg姜黄素可显著提高空肠和回肠杯状细胞数量(P<0.05);降低TLR4和Calprotectin蛋白的表达(P<0.05),提高sIgA蛋白表达,降低IL-1β、1L-6、TNF-α和TLR4mRNA的相对表达量(P<0.05),提高IL-10mRNA的相对表达量(P<0.05);喹烯酮组回肠杯状细胞数量显著增加(P<0.05),显著降低空肠TLR4mRNA口蛋白表达(P<0.05);200mg/kg姜黄素组显著增加回肠杯状细胞数量(P<0.05)。结果显示:添加300mg/kg或400mg/kg姜黄素可抑制肠粘膜炎症反应的发生,提高肠粘膜免疫屏障功能。综上所述,在日粮中添加300mg/kg或400mg/kg姜黄素可以促进仔猪生长,提高仔猪抗氧化性,改善肠粘膜形态结构,降低肠粘膜通透性,提高肠粘膜紧密连接和免疫功能,从而起到了保护肠道屏障的作用。因此得出结论,姜黄素具有作为绿色饲料添加剂替代抗生素的潜力。
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