目的：了解皖北地区3家教学医院临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药情况，探讨其关键耐药分子机制：β-内酰胺水解酶及主动外排机制，为临床抗菌药物治疗提供合理的指导和参考。方法：收集皖北地区3家教学医院2010年3月至2012年3月多重耐药鲍曼不动杆菌无重复分离株共43株，采用全自动细菌鉴定与药敏分析仪对收集菌株进行种属鉴定并测定其对15种抗菌药物的敏感性，采用PCR方法对关键的β-内酰胺酶基因（包括TEM、IMP、VIM、OXA-23、ISAba1-OXA-23）和外排泵基因AdeB进行了筛选，并对扩增产物进行测序分析；采用逆转录PCR（RT-PCR）检测AdeB基因的mRNA表达水平，分析其表达与细菌耐药性之间的关系。结果：1.43株非重复鲍曼不动杆菌病室来源以重症监护室最多（26株），其余为呼吸内科（5株）、神经外科（3株）、神经内科（2株）、烧伤整形科（2株），剩余5株来源于其他科室。标本来源分布情况：36株（83.7%）来源于痰液，4株来源于分泌物，其余3株分别来源于血液、脑脊液和尿液。2.15种抗菌药物中，临床常用药物（阿米卡星、环丙沙星、庆大霉素、头孢曲松、左氧氟沙星等）的耐药率均达到95%以上，碳青霉烯类抗生素（亚胺培南、美罗培南）有较高的耐药率，均为81.4%，头孢哌酮舒巴坦耐药率为69.8%，多粘菌素E耐药率为7.0%，替加环素为4.7%，利福平为16.3%。3.耐药基因检测：43株多耐药鲍曼不动杆菌中TEM阳性株数41株，阳性率95.3%；35株碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌中IMP、VIM、OXA-23、ISAba1-OXA-23的阳性株数分别为20株、1株、29株、25株，阳性率分别为57.1%、2.9％、82.9%、71.4%，29株OXA-23基因中25株上游检测到插入序列ISAba1，ISAba1-OXA-23经测序比对，与Genbank上的该序列同源性为100%。4.外排基因AdeB基因检测均为阳性，逆转录PCR（RT-PCR）方法检测AdeB基因表达水平结果：碳青霉烯耐药组和碳青霉烯相对敏感组菌株AdeB/GAPDH计算结果分别为（2.13±0.35）和（0.92±0.16），差异有统计学意义（P<0.05）。碳青霉烯类抗生素耐药组的AdeB基因mRNA水平高于相对敏感组（P<0.05）。结论：1.皖北地区3家教学医院的临床分离的鲍曼不动杆菌耐药情况较为严重，是值得关注的医院感染病原菌，其中以ICU临床分离率最高，呼吸系统感染更为常见。本地不动杆菌对多粘菌素、替加环素等耐药率仍较低，可作为临床治疗备选药物。2.本地鲍曼不动杆菌检测出β-内酰胺类药物水解酶主要包括：超广谱β-内酰胺酶blaTEM、金属酶blaVIM和blaIMP以及碳青霉烯酶blaOXA-23。3.本地鲍曼不动杆菌携带的blaOXA-23碳青霉烯酶基因序列上游普遍含有插入序列ISAba1，其比例为86.2%。4.主动外排基因AdeB的mRNA转录水平与碳青霉烯类耐药关系密切。