【摘 要】
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目的:观察电针对血管性痴呆（Vascular Dementia,VD）模型大鼠的认知行为学、海马组织CA1区病理形态学、海马区自噬相关蛋白Beclin1、LC3及PI3K/AKT/m TOR信号通路相关蛋白表达的影响,探讨电针对VD的作用机制。方法:采用反复阻断双侧颈总动脉（Common Carotid Arteries,CCA）的方法制备VD大鼠模型。将大鼠随机分为假手术组和待造模组,术后随机分
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目的:观察电针对血管性痴呆（Vascular Dementia,VD）模型大鼠的认知行为学、海马组织CA1区病理形态学、海马区自噬相关蛋白Beclin1、LC3及PI3K/AKT/m TOR信号通路相关蛋白表达的影响,探讨电针对VD的作用机制。方法:采用反复阻断双侧颈总动脉（Common Carotid Arteries,CCA）的方法制备VD大鼠模型。将大鼠随机分为假手术组和待造模组,术后随机分为模型组、电针100Hz组、2Hz组及2/100Hz组。电针组针刺“百会”“大椎”“膈俞”（双）“后三里”（双）穴并接电针仪。于造模后第17d进行跳台实验检测大鼠行为学,HE染色观察大鼠海马神经元病理形态变化,透射电镜观察大鼠海马神经元超微结构,Western Blot检测大鼠海马Beclin1、LC3、PI3K、p-AKT、p-m TOR蛋白的表达。结果:1.跳台实验:模型组大鼠学习记忆能力明显降低（P<0.01）;电针治疗组均可提高大鼠学习记忆水平（P<0.01）;电针2Hz、2/100Hz组大鼠错误次数少于100Hz组（P<0.05,P<0.01）。2.HE染色:假手术组海马区神经元形态规则,结构完整,排列整齐,无明显脱落丢失。模型组细胞形态欠规则,疏松杂乱,脱落明显。各电针组神经元细胞形态较规则,排列较整齐,细胞脱落较少。3.透射电镜:假手术组大鼠海马神经元细胞核膜完整,少量细胞损伤。模型组中大量细胞线粒体肿胀,神经元细胞中可见空泡及双层膜结构自噬小体。各电针组线粒体肿胀减轻,少量神经元细胞可见自噬体。4.Western Blot检测:模型组Beclin1蛋白表达和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均升高,PI3K、p-AKT、p-m TOR蛋白表达均降低（P<0.01）;电针组均可降低Beclin1蛋白表达和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值,上调PI3K、p-AKT、p-m TOR蛋白表达（P<0.01）。其中电针2/100Hz组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ低于2Hz、100Hz组（P<0.01）,100Hz组PI3K蛋白表达高于2Hz、2/100Hz组（P<0.01）,2Hz、2/100Hz组p-AKT蛋白表达高于100Hz组（P<0.05,P<0.01）,2Hz、2/100Hz组p-m TOR蛋白表达高于100Hz组,2/100Hz组存在显著差异性（P<0.01）。结论:电针“百会”“大椎”“膈俞”“后三里”可提高脑缺血再灌注VD模型大鼠学习记忆能力,明显改善模型大鼠认知障碍,其作用机制可能是通过激活PI3K/AKT/m TOR信号通路,抑制自噬过度激活,从而减轻海马神经元损伤,发挥脑保护作用。且不同频率电针对模型大鼠认知功能改善及细胞自噬和PI3K/AKT/m TOR信号通路相关蛋白的调控作用存在一定差异,总体以变频和低频优于高频。
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