醋酸棉酚对人舌鳞癌Tca8113细胞MGMT和hMLH1基因蛋白及mRNA表达的影响

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhulixiao66
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目的:观察体外应用醋酸棉酚(GAA)对人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1、MGMT基因蛋白表达的情况;检测体外应用GAA对人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1、MGMT基因mRNA水平的影响;检测体外应用GAA对入舌鳞癌Tca8113细胞DNA甲基转移酶mRNA的表达情况。探讨棉酚的抗肿,瘤作用机制。方法:常规培养人舌鳞癌Tca8113细胞,用不同浓度的GAA处理细胞,应用Western-b lot检测hMLH1、MGMT基因的蛋白水平变化;利用免疫共沉淀法检测人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1、MGMT基因蛋白相互作用;应用RT-PCR法检测不同浓度的GAA处理后的人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1、MGMT基因及DNA甲基转移酶(DNMT1)mRNA表达的变化。结果:Western-blot检测显示,用不同浓度的GAA分别处理人舌鳞癌Tca8113细胞24h.48h、72h, hMLH1、MGMT基因的蛋白表达比对照组明显增高(P<0.05);免疫共沉淀法检测结果显示人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1、MGMT基因蛋白表达有相互作用;经RT-PCR检测,用不同浓度的GAA处理后的人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1、MGMT基因的mRNA与对照组比较表达增高,且呈药物剂量依性(P<0.05);DNA甲基转移酶(DNMT1)mRNA表达降低(P<0.05)结论:人舌鳞癌Tca8113细胞系中存在hMLH1和MGMT基因蛋白表达下调或缺失:一定浓度的GAA能使人舌鳞癌Tca8113细胞系hMLH1、MGM1基因的蛋白及mRNA表达增高。提示棉酚能不同程度使该基因激活并使之表达上调,可作为抗肿瘤治疗的潜在靶点;一定浓度的GAA能够使人舌鳞癌Tca8113细胞系DNA甲基转移酶(DNMT1)mRNA表达降低。提示棉酚能下调DNMT1活性,这可能是棉酚抗肿瘤作用的机制之一。
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