【摘 要】
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作为天然免疫的效应分子,人源阳离子抗菌肽hCAP-18/LL-37不仅具有广谱的体内外抗菌活性,还具有趋化、促血管生成等多重生物学效应。近年研究发现,hCAP-18/LL-37还参与机体的获得性免疫,但机制尚不十分清楚。 为了深入探讨hCAP-18/LL-37参与机体获得性免疫的可能机制,本研究从基因工程的角度入手,从正常人外周血中性粒细胞中克隆出hCAP-18/LL-37基
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作为天然免疫的效应分子,人源阳离子抗菌肽hCAP-18/LL-37不仅具有广谱的体内外抗菌活性,还具有趋化、促血管生成等多重生物学效应。近年研究发现,hCAP-18/LL-37还参与机体的获得性免疫,但机制尚不十分清楚。 为了深入探讨hCAP-18/LL-37参与机体获得性免疫的可能机制,本研究从基因工程的角度入手,从正常人外周血中性粒细胞中克隆出hCAP-18/LL-37基因,分别构建了表达cDNA全长肽和成熟肽的真核表达载体,并实现该基因的真核表达,建立了稳定转染的Hela细胞株,经RT-PCR及Western blot鉴定,在转染细胞及细胞培养上清中均检测到hCAP-18/LL-37的表达。将转染细胞培养上清与外周血分离培养的未成熟DC共同孵育,流式细胞仪检测DC表面标志物的表达及细胞周期和凋亡,结果显示:hCAP-18/LL-37可上调DC表面分子CD86、CD40及HLA-DR的表达;通过混合淋巴细胞反应（MLR）,结果显示:hCAP-18/LL-37能促进DC刺激同种异体T淋巴细胞应答的能力;通过淋巴细胞转化实验,结果显示:hCAP-18/LL-37能促进外周血淋巴细胞增殖转化的能力。本研究实验结果表明,hCAP-18/LL-37可通过促进DC的分化成熟,增强DC的抗原提呈能力,而参与机体的获得性免疫,从而为hCAP-18/LL-37在抗感染治疗和免疫调节等方面的应用提供理论依据,为其作为免疫生物制剂的新药开发和研制奠定实验基础。
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