目的:本实验通过观察中药复方益糖康对2型糖尿病大鼠体内法尼酯衍生物X受体(FXR)及磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)与葡萄糖6-磷酸酶(G6Pase)表达的影响,探讨中药复方益糖康对2型糖尿病大鼠肝糖异生的作用及机制。材料与方法:70只SPF级Wistar大鼠,随机选取10只为正常对照组,其余60只给予高脂饲料诱导,以腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方式复制2型糖尿病动物模型,并再随机分为三组给与不同干预措施。益糖康组大鼠给予益糖康10ml·kg-1灌胃+生理盐水2ml·kg-1腹腔注射,鹅去氧胆酸(CDCA)组给予生理盐水10ml·kg-1灌胃+CDCA配制液2ml·kg-1腹腔注射,空白对照组与模型对照组给予同体积生理盐水灌胃+同体积生理盐水腹腔注射,每日一次,连续六周。造模前及造模后第2、4、6周末,检测大鼠空腹血糖及体重情况,并于6周末取材。用全自动生化分析仪检测各组大鼠血脂水平变化情况;采用Elisa法检测各组大鼠胰岛素水平;对肝组织切片进行HE染色和油红O染色观察肝组织病理形态学改变及脂质沉积变化;运用Western Blot和RT-PCR技术检测大鼠肝脏组织FXR、PEPCK、G6Pase蛋白及基因表达情况。结果:1.空白对照组大鼠精神状态良好、进食饮水二便正常、皮色光亮顺滑;造模组大鼠注射STZ后体重明显开始下降,饮水量急剧增加,小便量也明显增多;精神状态萎靡,行动迟缓,进食情况下降。给予益糖康与CDCA干预措施两周后,两组大鼠相对于模型组精神状态明显开始有所好转,体重下降较缓,进食情况增加,饮水及小便量有所改善。2.体重监测结果表明,干预前,与空白对照组相比,其余三组大鼠体重有明显的升高(P<0.01);干预6周后,与空白对照组相比,其余三组大鼠体重显著降低(P<0.01);与模型对照组相比,益糖康组及CDCA组的大鼠体重在干预后体重下降趋势明显变缓,相对于模型组体重显著升高(P<0.05或P<0.01)。3.FBG监测结果表明,干预前与空白对照组相比,其余三组大鼠FBG明显升高(P<0.01),而三组之间并没有显著差异(P>0.05);在干预2,4,6周后与空白对照组相比,其余三组大鼠FBG仍明显升高(P<0.01),而与模型对照组相比,益糖康组与CDCA组的大鼠FBG则显著降低(P<0.01)。4.血脂水平及胰岛素水平检测结果显示,与空白对照组相比,模型组大鼠血清中T G、TC及INS水平均明显升高(P<0.01)。药物干预后,益糖康组及CDCA组TG、TC及INS水平均较模型组降低(P<0.01或P<0.05)。与CDCA组相比,益糖康组TC的水平升高(P<0.01),TG及INS水平差异无统计学意义(P>0.05)。5.肝功能水平检测结果显示:与空白对照组相比,其余三组大鼠血清ALT、AST水平明显升高(P<0.01);与模型对照组相比,益糖康组及CDCA组ALT、AST显著降低(P<0.01或P<0.05);益糖康组与CDCA组相比较ALT、AST没有统计学差异(P>0.05)。6.HE染色结果提示:空白对照组大鼠肝脏细胞呈圆形,细胞核大而圆且居中,肝索条理清晰,排列整齐,肝窦未见狭窄,偶见小泡性脂肪滴空泡;模型组大鼠肝脏细胞肿胀明显,体积增大,内含大量脂肪空泡,核染色变浅或消失,核或被挤压到一侧,伴有散在点状的肝细胞坏死及大量炎症浸润,脂肪变性明显;与模型组相比,益糖康组肝脏细胞体积明显变小,细胞肿胀减轻,脂肪空泡明显减少,肝细胞脂肪变性程度减轻;CDCA组肝细胞排列相对整齐,体积部分恢复接近正常,脂肪空泡显著减少,肝细胞脂肪变性程度显著减轻。7.油红O染色结果提示:空白对照组大鼠肝细胞内未见明显橘红色脂滴;模型组胞浆可见弥漫性橘红色脂滴,相邻肝细胞内脂滴融合,肝脏脂肪变性明显;与模型组相比,益糖康组及CDCA组肝细胞胞浆内橘红色脂滴均明显减少;中药降糖方组与CDCA组间未见显著差异。8.Western blot检测结果显示,与空白对照组相比,模型组大鼠肝脏中FXR蛋白表达显著降低,PEPCK、G6Pase水平显著升高(P<0.01或P<0.05);与模型组相比,益糖康组及CDCA组FXR蛋白表达显著升高,PEPCK、G6Pase蛋白表达显著降低(P<0.01),与CDCA组相比,益糖康组FXR、PEPCK、G6Pase蛋白表达均无统计学差异(P>0.05)。9.免疫组化结果可见,正常组大鼠肝组织PEPCK、G6Pase低表达,大鼠肝组织FXR正常表达,阳性颗粒散在,染色较浅;模型组大鼠肝组织PEPCK、G6Pase高表达,棕黄色信号强,融合成片,FXR表达减少;与模型组相比,益糖康组及CDCA组大鼠肝脏细胞PEPCK、G6Pase表达明显降低,棕黄色信号减弱,FXR表达明显增多,棕黄色信号强,且两组之间未发现显著差异,与上述蛋白表达结果一致。10.RT-PCR检测结果显示,与空白对照组相比,模型组大鼠肝脏组织内FXR m RNA水平显著降低,PEPCK、G6Pase m RNA水平显著升高(P<0.01或P<0.05)。与模型组相比,益糖康组及CDCA组FXR m RNA水平显著升高,PEPCK、G6Pase m RNA水平明显下降(P<0.01)。与CDCA组相比,益糖康组PEPCKm RNA水平显著升高(P<0.05),FXR、G6Pase m RNA水平均无统计学差异(P>0.05)。结论:1.中药复方益糖康可以改善2型糖尿病大鼠的糖、脂代谢紊乱以及肝损伤情况。2.中药复方益糖康可以调节2型糖尿病大鼠肝糖异生水平3.中药复方益糖康可以激活FXR的表达。4.中药复方益糖康对2型糖尿病大鼠的血糖调节作用可以通过激活核受体FXR来下调PEPCK与G6Pase的表达从而影响肝糖异生实现。