论文部分内容阅读
树突状细胞(DC)是专职的抗原递呈细胞(APC)，是唯一能激活纯真T细胞的APC，在肿瘤免疫治疗中起重要作用。本文研究联合应用各种细胞因子体外培养初诊慢性髓系白血病(CML)患者和完全缓解(CR)期急性髓系白血病(AML)患者的骨髓单个核细胞(BMMC)以生成DC，并采用自行设计的AML细胞溶解液(WTL)，探讨应用培养的DC能否诱导抗髓系白血病的特异性免疫。 结果 1．14例CML患者BMMC应用GM-CSF、IL-4和TNF-α培养7—8天，除已用羟基脲治疗的1例外，其余13例初诊未治患者均培养出DC。(1)细胞回收率为61.04％±34.18％，培养细胞的细胞膜可见明显树突状突起，表达DC相关表型(CD1a、CMRF44、CD86和HLA-DR)，CD1a阳性率约为30％；培养细胞异基因刺激指数为4.22±0.50，高于未培养BMMC的2.58±0.53(P=0.010，符合DC特性。(2)应用CML细胞衍生的DC刺激自体T细胞，可诱导出细胞毒T细胞(CTL)，其对自体CML细胞的细胞毒活性(E／T 20：1)为48.46％±15.76％，明显高于单用IL-2刺激的T细胞的1.09％±0.49％(P=0.016)，而两组T细胞对K562细胞的杀伤无差异。应用DC刺激的和单用IL-2刺激的T细胞以CD3+CD8+为主，伴有CD25和HLA-DR增加，但两者无差异。 2．AML-CR期的BMMC应用SCF、GM-CSF和IL-4培养，第5天加WTL冲击后，第6天再加TNF-α培养。(1)培养7-8天后，培养的细胞具有典型的形态学突起和DC表型，应用WTL和未用WTL冲击的细胞回收率分别为63.24％±24.76％和66.72％±26.35％，CD1a阳性率分别为37.21％±4.95％和27.53％±4.65％，其他细胞表型无差异。(2)单用IL-2、未冲击DC和WTL冲击DC刺激的T细胞对自身AML靶细胞的细胞毒活性分别为8.13％±5.47％、8.82％±2.89％和53.50％±10.09％(E／T 20：1)，但对K562细胞无明显的细胞毒活