【摘 要】
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本实验利用ICR品系小鼠13.5dpc的胚胎制备小鼠胚胎成纤维细胞,并以小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层;收集3.5dICR小鼠的囊胚和桑椹胚进行体外培养,筛选纯化ES细胞集落,使其稳定
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本实验利用ICR品系小鼠13.5dpc的胚胎制备小鼠胚胎成纤维细胞,并以小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层;收集3.5dICR小鼠的囊胚和桑椹胚进行体外培养,筛选纯化ES细胞集落,使其稳定传代后,对其形态学和生物学性状进行初步鉴定.结果表明:1.ES细胞有其典型的形态学特征:集落呈鸟巢状,边缘清楚,表面平滑,结构致密,隆起生长,细胞之间界限不清楚;单个细胞体积小、核大.2.对ES细胞碱性磷酸酶进行检测,在AKP底物NBT、BCIP作用下,未分化的ES细胞显微镜下为黄褐色,分化的不着色.3.通过核型鉴定,ES细胞具有正常的二倍体核型.4.在有滋养层未加入小鼠白血病抑制因子的条件下,小鼠ES细胞在F<,2>代时将会分化成其它细胞;在有滋养层且加入小鼠白血病抑制因子时,生长至F<,8>代及F<,11>代又会发生分化.
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