论文部分内容阅读
有机磷杀虫剂毒死蜱(CPF)在全球农业生产和公共卫生项目中的广泛使用,已经引起了严重的环境污染和健康危害,包括急、慢性人类中毒。视网膜也是CPF作用的靶器官之一。但目前对其中毒机制还不十分明了。以前的研究主要侧重于CPF对视网膜细胞中乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用。本研究主要是探讨CPF能否诱导小鼠视网膜细胞产生氧化胁迫并致其凋亡,而联合应用维生素C和E对CPF的视毒性是否有抑制作用。试验小鼠被随机分成4组(每组20只):对照组(Control);维生素C加维生素E处理组(VC+VE);毒死蜱处理组(CPF);和CPF加维生素C和维生素E处理组(CPF+VC+VE)。VC+VE组和CPF+VC+VE组用维生素C 250 mg/kg和维生素E 150mg/kg预处理,皮下注射,每天1次,持续6天。其它组同时皮下注射生理盐水。之后,CPF组和CPF+VC+VE组通过强迫饲喂给予CPF(63 mg/kg),该剂量为半致死剂量的1/4。在CPF处理24小时后,所有的鼠麻醉后被杀死,摘除视网膜。部分视网膜被用来做电镜标本,观察其细胞的形态学改变,以及用共聚焦显微镜检测钙离子浓度。部分视网膜被分离成单细胞悬液进行彗星电泳,AO/EB双重染色,以及用流式细胞仪检测细胞凋亡。剩余的视网膜被制成匀浆用来检测丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,过氧化氢酶(CAT)活性,谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性和乙酰胆碱酯酶(AChE)活性。结果显示:CPF组小鼠视网膜细胞中产生了脂质过氧化,DNA损害程度增强,部分细胞发生凋亡,同时抗氧化酶SOD、CAT和GPX的活性降低,而抗氧化剂维生素C和E的联合使用则可以明显抑制CPF的这些细胞毒作用,这说明CPF所诱导的小鼠视网膜细胞凋亡确实是由氧化胁迫造成的。我们还观察到,CPF还可以抑制小鼠视网膜细胞中的AChE活性,并促进其胞内钙离子浓度增加,而联合应用维生素C和E,对这些作用具有明显和有效的抑制效果。我们的结果说明:①有机磷杀虫剂CPF可经由氧化胁迫途径诱导小鼠视网膜细胞凋亡,在该过程中CPF降低了AChE活性并增加了细胞内钙离子的浓度。本研究结果有助于进一步阐明CPF和其它有机磷杀虫剂引起中毒的机制;②外源性抗氧化剂维生素C和E的联合应用,明显地降低了CPF对小鼠视网膜细胞的损害作用。上述研究结果提示,在临床治疗有机磷杀虫剂引起的视毒性时,除了使用传统的解毒剂进行治疗外,如果再结合使用维生素C和E的抗氧化治疗,也许会收到更好的效果。