血清AngⅡ、KLK1水平及ACE和KLK1基因多态性与急性心肌梗死的关联研究

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研究背景急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)是冠心病中最严重的类型之一。临床发现AMI患者血清血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ,AngⅡ)升高。尽管大量研究表明激肽释放酶1(The human tissue kallikrein1,KLK1)为心血管疾病发生的保护性因素,近年来研究发现在不稳定动脉硬化斑块中KLK1表达也增加。基因学研究发现血清中AngⅡ水平受血管紧张素转化酶(Angiotensinogenenzyme,ACE)及糜蛋白酶等的调控,他们催化无活性的血管紧张素I(Angiotensin I,AngⅠ)转化为具有血管活性的AngⅡ,发挥生物学作用。KLK1是丝氨酸蛋白家族中唯一生成缓激肽的关键酶。多数研究表明,AMI的发生与ACE基因的多态性有关,具有ACEDD基因型发生冠心病或AMI的危险性明显增加。另外,也有meta分析显示ACEDD基因型增加冠脉内支架再狭窄(OR = 2.18,95%CI:1.08-4.40)。血清中KLK1为KLK1基因的表达产物,它同样存在多态性,我们前期研究发现KLK1 GG基因型的个体较AA基因型冠状动脉狭窄(coronary artery stenosis,CAS)发生率高。AC和KLK1基因及表达在维持机体心血管正常功能方面起着关键作用。AMI是多基因疾病,单独的基因作用可能相对较微弱。本研究以冠脉造影发现CAS诱发的AMI患者与冠脉造影确定无狭窄的个体为研究对象,测定血清AngⅡ和KLK1水平及ACE和KLK1基因多态性4项指标,采用病例-对照分析方法,探讨他们与AMI的关联。目的探讨血清AngⅡ、KLK1水平及ACE和KLK1基因多态性与急性心肌梗死(AMI)的关联。方法冠脉造影确诊的208例AMI患者和216例正常对照为研究对象,采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定血清 AngⅡ、KLK1 水平;聚合酶链反应(PCR)扩增测定ACE(rs4646994)插入/缺失(insertion/deletion,I/D)基因型,PCR-TaqMan-MGB探针基因分型技术检测KLK1(rs5517)A/G基因型,基因直接测序法分析验证基因分型准确性。应用二元Logistic回归分析他们与AMI的关联。结果1.病例组和对照组血清AngⅡ水平分别为119.83±52.80和185.04±61.55(ng/L),血清KLK1水平分别为21.68±13.64和22.63±8.69(ng/ml),其中2组KLK1均值差异无统计学意义。2.血清指标高低值组合分层(AngⅡ≦120&KLK1≦22、AngⅡ120&KLK1>22、AngⅡ>120&KLK1≦22和AngⅡ>120&KLK1>22)构成比差异有统计学意义(x2=17.724,P<0.001)。3.2组ACE DD基因型频率分别为23.1%和9.3%;KLK1 GG基因型频率分别为31.5%和40.4%;差异有统计学意义。ACE和KLK1基因型的组合分层频率差异也有统计学意义(x2=10.573,P=0.005)。4.在包括14个混杂因素(性别、年龄、吸烟史、糖尿病史、血生化和血凝指标(ALT、GGT、TP、DBIL、TBA、CHO、HDL、GLU、CR 和 TT))和 2 血清指标及2个基因型组合分层的回归模型中,与血清AngⅡ≦ 120&KLK1 ≦22层比较,后3层与AMI都有显著性关联,其OR(95%CI)分别为4.62(1.11-19.33)、11.32(3.47-37.00)和 23.85(6.88-82.65)。5.在多因素Logistic回归模型中,调整上述14个混杂因素后,ACEDD基因型增加AMI的危险,然而单独的KLK1基因多态性不增加AMI的患病风险。6.与具有ACE和KLK1基因其他型的个体比较,具有ACEDD型和KLK1 GG基因型的个体发生AMI的风险显著增高(OR=8.77、95%CI=1.74-44.16)。结论1.血清AngⅡ水平增高发生AMI的危险性增加;2.2血清AngⅡ与KLK1水平同时升高则AMI的危险性显著增加;3.ACEDD基因型增加AMI的危险,具有ACEDD和KLK1 GG基因型的个体发生AMI的风险较其它型型显著增高,2基因型与AMI的易感性存在协同作用。
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