背景:糖尿病肾病（DN）是糖尿病的主要慢性并发症,如不及时有效治疗,常会在数年内不可逆进展,最终导致终末期肾病。糖尿病肾病的发病机制综合而复杂,可能有多种综合因素参与其中。就DN的临床治疗而言,传统的降糖、降压和调脂治疗虽然可以在一定程度控制病情,但效果并不十分理想。我们的课题组在前期研究中发现,高糖环境培养的小鼠肾小球系膜细胞（MMCs）的增殖及纤维化水平明显高于其低糖对照组,而lncRNA CYP4B1-PS1-001可以有效抑制MMCs的增殖和纤维化,并可能通过此途径参与调控DN的发病。此外,RNA芯片结果显示Cyp4a14是CYP4B1-PS1-001的邻近mRNA。Cyp4a14属于CYP450家族,该家族编码的蛋白质参与了胆固醇、类固醇以及其他脂质的合成。有研究发现Cyp4a14可能与肾脏的血流动力学、糖与脂质代谢存在一定关系,但是Cyp4a14在糖尿病肾病中的作用尚不清楚。目的:通过研究糖尿病肾病小鼠肾组织及高糖培养的MMCs中Cyp4a14的表达水平,并初步探索其与CYP4B1-PS1-001之间的调控关系,并观察siCyp4a14对MMCs增殖及纤维化的影响,探讨其在DN发生及进展中的作用。方法:构建糖尿病肾病db/db小鼠及对照db/m小鼠模型并取肾组织,应用RNA芯片技术结合基因本体（Gene Ontology,GO）分析,筛选出了lncRNA CYP4B1-PS1-001的邻近mRNA Cyp4a14作为研究目标,RT-qPCR验证Cyp4a14在小鼠肾组织及细胞中的表达水平。继而通过包装慢病毒载体并感染小鼠肾系膜细胞,获得稳定表达lncRNA CYP4B1-PS1-001细胞株及其对照细胞株。应用RT-qPCR和Western blot,分别检测其中Cyp4a14在mRNA与蛋白水平的表达差异。针对Cyp4a14设计合成siRNA,并采用RT-qPCR及Western blot检测其敲低效率,继而开展一系列功能实验:Western blot和RT-qPCR检测PCNA、Cyclin D1、Collegen Ⅰ和fibronectin等增殖及纤维化指标的表达;CCK-8实验检测MMCs增殖活性;平板克隆形成实验检测MMCs克隆形成能力。结果:（1）根据糖尿病肾病db/db小鼠及对照db/m小鼠肾组织RNA芯片的结果,筛选出糖尿病肾病小鼠肾组织中异常高表达的基因Cyp4a14,组织样本RT-qPCR验证结果与基因芯片结果一致;（2）Cyp4a14为lncRNA CYP4B1-PS1-001的邻近基因,且我们的课题组已在前期实验中证实,CYP4B1-PS1-001在db/db小鼠模型肾组织中低表达并且可以抑制MMCs的增殖及纤维化;（3）构建稳定表达CYP4B1-PS1-001的小鼠肾系膜细胞株并收集细胞进行RT-qPCR和Western blot实验,发现过表达lncRNA CYP4B1-PS1-001能够下调Cyp4a14的表达水平;（4）应用特异性siRNA转染MMCs以沉默Cyp4a14后,Western blot与RT-qPCR检测细胞中各项增殖及纤维化指标（PCNA、Cyclin D1、Collegen Ⅰ及fibronectin）表达水平均受抑制;CCK-8实验结果表明细胞增殖活性下降;平板克隆形成实验显示,转染siRNA-Cyp4a14的实验组克隆形成数较对照组明显减少。结论:Cyp4a14在高糖环境培养的MMCs中高表达,且表达水平受CYP4B1-PS1-001的调控;siRNA-Cyp4a14能够明显抑制MMCs的增殖和纤维化。