【摘 要】
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蛋白质组学及其在肿瘤研究中的应用是目前生命科学中的热点研究领域。人血清中蛋白质数量极大,是非常理想的生物样本。但由于血清中高丰度和低丰度蛋白的含量相差大,且许多低
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蛋白质组学及其在肿瘤研究中的应用是目前生命科学中的热点研究领域。人血清中蛋白质数量极大,是非常理想的生物样本。但由于血清中高丰度和低丰度蛋白的含量相差大,且许多低丰度的小分子量蛋白/多肽是和高丰度蛋白结合在一起的,很难检测。而这些低丰度的小分子量蛋白往往对人体起非常重要的作用。本文应用多维色谱和基质辅助激光解吸附/电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）结合对人血清中的蛋白进行了分离和检测。通过比较健康人血清和肿瘤患者血清蛋白的差异,筛选出了一些肿瘤标志物。本论文包括以下五个部分: 1.文献综述。对蛋白质组学作了简单叙述,介绍了蛋白质组学的内容、方法以及研究现状,重点介绍了人血清蛋白组学及其在肿瘤研究中的应用。 2.实验部分。介绍了实验仪器、试剂以及实验步骤。 3.SEC-RPLC和MALDI-TOF MS对人血清的分离与检测。用5mol·L-1脲对人血清进行稀释和变性,以消除血清中蛋白质-蛋白质/多肽之间的相互作用力,然后用体积排阻色谱（SEC）对变性后血清中的蛋白按其分子量的大小进行分离并富集,得到了分子量较小但种类较多的低丰度蛋白,从而消除了高丰度大分子量蛋白质对小分子量蛋白/多肽的影响。经过反相色谱（RPLC）进一步分离后,并用MALDI-TOF MS在未酶解的情况下直接分析检测这些蛋白。在人血清中共检出300余种低分子量蛋白/多肽（15kDa以下）,同时通过比较变性前后这些蛋白/多肽种类及丰度的变化,得到了80余种与白蛋白相结合的小分子量蛋白。 4.IEC-RPLC和MALDI-TOF MS对血清中蛋白的分离与检测。分别用弱阳离子交换色谱、弱阴离子交换色谱对血清作了分离,发现用弱阴离子交换色
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