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背景:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,严重危害女性的健康和生命。随着平均寿命的延长、城市化程度的提高以及西方生活方式的普及,乳腺癌的发病率在发展中国家呈上升趋势。据2019年美国癌症协会期刊《CA Cancer J Clin》发表的2019年全美肿瘤预估报告显示,在导致美国女性死亡的肿瘤排名中,乳腺癌第二,占15%。ARHGDIB是Rho GTPase的关键调控因子之一,在肿瘤细胞的迁移、侵袭、转移以及多耐药等多种恶性表型的发展中起着重要作用。乳腺癌发生转移以及在治疗过程中产生耐药是乳腺癌患者预后较差的主要原因。明确与乳腺癌转移和耐药的相关基因及其作用机制可为乳腺癌的治疗提供新的研究思路。目的:观察ARHGDIB在乳腺组织样本、常见乳腺细胞系以及乳腺癌阿霉素耐药细胞系中的表达情况。探讨ARHGDIB的敲低对乳腺癌细胞克隆形成能力、细胞周期、迁移、侵袭以及阿霉素耐药的影响。方法:1)采用免疫组织化学(immunochemistry,IHC)方法检测100例乳腺癌组织以及100例乳腺良性病变组织中ARHGDIB的表达情况。2)应用免疫蛋白印迹(western blot)的方法检测ARHGDIB在正常乳腺上皮细胞系、乳腺癌细胞系以及乳腺癌阿霉素耐药细胞系中的表达情况。3)选用ARHGDIB高表达的乳腺癌细胞系MDA-MB-231以及乳腺癌阿霉素耐药细胞系MCF-7/ADR,转染靶向ARHGDIB基因编码区(CDS)的si RNA(si AR)干扰其表达并使用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,q PCR)以及western blot的方法检测干扰效率。4)在MDA-MB-231中通过克隆形成实验观察干扰ARHGDIB的表达对乳腺癌细胞克隆形成能力的影响。5)在MDA-MB-231中通过细胞周期实验观察干扰ARHGDIB的表达对乳腺癌细胞细胞周期的影响。6)在MDA-MB-231中通过细胞迁移和侵袭实验观察干扰ARHGDIB的表达对乳腺癌细胞细胞迁移和侵袭能力的影响。7)在MDA-MB-231中通过免疫蛋白印迹法检测干扰ARHGDIB表达对乳腺癌EMT标记物的影响。8)在MCF-7/ADR中通过MTT实验检测干扰ARHGDIB表达对乳腺癌阿霉素耐药的影响。结果:1)免疫组化结果显示,ARHGDIB的表达主要定位于乳腺上皮细胞及癌细胞的细胞质中,100例乳腺癌标本中其高表达率为74.0%(74/100),乳腺良性病变组织的高表达率为39.0%(39/100),差异具有统计学意义(P<0.01)。2)Western blot结果显示,ARHGDIB在乳腺癌细胞系中表达水平较高,特别是在高侵袭性的乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞中表达水平最高;在乳腺癌阿霉素耐药细胞系MCF-7/ADR中的表达高于其亲本细胞MCF-7。3)RT-q PCR以及western blot实验结果显示转染si AR后,MDA-MB-231以及MCF-7/ADR细胞中该基因的m RNA以及蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。4)在MDA-MB-231细胞中,克隆形成实验结果显示,si AR组细胞克隆形成能力显著受到抑制(P<0.01)。5)在MDA-MB-231细胞中,细胞周期实验结果显示,si AR组细胞周期阻滞在G0/G1的细胞数目显著增加(P<0.01)。6)在MDA-MB-231细胞中,细胞迁移和侵袭实验结果显示,si AR组细胞的迁移和侵袭能力均显著受到抑制(均P<0.01)。7)Western blot结果显示,与对照组相比,si AR组细胞的间质标志蛋白MMP-2表达水平下降,而上皮标志蛋白β-catenin表达水平上调(均P<0.01)。8)在MCF-7/ADR细胞中,MTT实验结果显示,si AR组细胞对阿霉素的耐药性明显受到抑制(P<0.01)。结论:ARHGDIB通过调节EMT相关蛋白在乳腺癌中的表达水平,进而促进乳腺癌的发展和阿霉素的耐药,可能成为乳腺癌诊断以及治疗的潜在靶点。