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糖尿病及其衍生的糖尿病肾病是人类常见的疾病,一旦发展到肾脏病终末期,将会极大的威胁患者的生命健康。因此及时在早期预防糖尿病肾脏的病变有重要的意义。而目前治疗,预防糖尿病肾病的药物,大多具有副作用。因此,无毒副作用又能有效的保护肾脏的新型药物是如今急需的。本课题主要研究生物活性肽LHY7在糖尿病小鼠体内的保肾作用,并就其保肾机制进行初步探究。首先,用生物信息学的方法预测分析裂殖壶菌藻粕酶解肽,从中筛选若干具有功能性的寡肽。接下来进行目标生物活性的体外功效试验。用酶解肽对小鼠肾小球系膜细胞(SV40MES13)初探,结果表明具有明显的抑制率。接下来对目标生物活性肽抑制细胞增殖进行功效测试,实验结果表明,标号为2-12、LHY7、LHI7这三种生物活性肽的细胞抑制率最高。然后将此三种生物活性肽分别制备成1、0.1、0.01、0.001和0.0001mg/mL的五个浓度梯度的溶液,分别进行细胞培养。实验结果表明,该活性肽抑制细胞增殖的作用具有浓度依赖性。经过细胞培养48h后,活性肽浓度为0.1mg/mL时,2-12、LHY7、LHI7活性肽的细胞抑制率相对较高,其中LHY7的抑制率最高,为46%。由此可见,LHY7号活性肽具有一定的抑制细胞增殖作用,且最适的浓度为0.1mg/mL。第二,通过构建Ⅰ型糖尿病小鼠模型,采用腹腔注射给药方式,研究生物活性肽LHY7,活性肽浓度为0.1mg/mL时,对小鼠体重、血糖、肾脏生理指标和肾脏组织的作用功效。结果表明:腹腔注射给予LHY7,小鼠肾脏器系数相比于模型组有显著降低,说明活性肽能一定程度上抑制肾脏肥大,并且活性肽组小鼠体重有所上升。通过测定小鼠血糖,与给药前和模型组比较有极显著下降,说明活性肽具有降血糖的功效;测定小鼠尿微量白蛋白,血清尿素氮和肌酐等指标,表明活性肽能在一定程度上延缓肾功能损伤;进行小鼠肾脏组织切片分析发现给药后的病理变化比模型组有明显减轻。第三,在基因水平上,通过半定量PCR和Q-PCR的方法,分析生物活性肽,对Ⅰ型糖尿病小鼠的肾损伤相关调节因子ACE和ACE2的表达量。半定量PCR结果显示ACE的表达量有所下降,ACE2的表达量有所上升。为了更准确的研究活性肽对各调节因子的影响,进行了Q-PCR,其结果显示经过LHY7处理的糖尿病小鼠的ACE表达量相比于模型组显著下降,ACE2的表达量显著上升。因此,生物活性肽可以通过调节基因表达量,减少肾损伤。