论文部分内容阅读
毒死蜱(CPF)是广泛应用于农业生产中的一种高效、低毒的有机磷农药,但对鱼类和水生动物则为高毒。毒死蜱的大量使用对鱼类等非靶标生物的毒害作用日渐突出。毒死蜱可经鱼类呼吸道、皮肤吸收,主要分布于肝脏、肾脏、脾脏等血流量比较高的器官,从而引起鱼体生理生化和代谢功能的变化。有关毒死蜱对鲤鱼的免疫毒性,如对溶菌酶活性、IgM和C3含量以及基因表达的研究尚未见相关的研究报道。本研究以鲤鱼为实验材料,用不同浓度的毒死蜱(15μg/L和75μg/L)处理鲤鱼7d,分别于第1、3、5、7d取血液、肝脏、脾脏、肾脏组织。采用ELISA和实时定量PCR技术分别在蛋白质和基因水平上探讨了毒死蜱对鱼类的免疫毒性,主要实验结果如下:(1)通过上下法得出的毒死蜱对鲤鱼的96h-LC50为149.2μg/L(95%可信限为:126-158μg/L),说明毒死蜱对鲤鱼的毒性级别为高毒。(2)脏器指数测定结果显示,毒死蜱对鲤鱼肝脏、脾脏、肾脏脏器指数影响不大。(3)通过微孔板Micrococcus lysodeikticus浊度试验测定血清、肝脏、脾脏、肾脏中溶菌酶的活性变化,结果显示,较低浓度CPF(15μg/L)暴露,早期血清、肝脏、脾脏、肾脏中溶菌酶活性增加,但随着染毒时间的增加溶菌酶活性逐渐趋于对照组水平,表明低浓度暴露对鲤鱼的免疫毒害是可逆的;较高浓度CPF(75μg/L)处理则抑制了血清、肝脏、脾脏中溶菌酶的活性,对肾脏中溶菌酶活性无影响。(4)通过ELISA检测鲤鱼血清、脾脏、肾脏中IgM含量和C3含量变化,结果显示, CPF暴露抑制了血清、脾脏中IgM的蛋白表达,然而却促进了肾脏中IgM含量的表达。脾脏C3含量无变化,但血清和肾脏中C3含量升高。(5)通过实时定量PCR技术检测脾脏和肾脏中IgM和C3基因表达变化,结果显示,IgM和C3基因在暴露前期表达上调,但是在处理后期基因表达下调。(6)本实验结果表明,毒死蜱对鲤鱼具有明显的免疫毒性。