菜籽粕蛋白提取及酶解肽的制备和抗氧化性研究

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菜籽粕作为油菜籽加工的副产物具有广阔的应用前景,菜籽粕含有丰富的菜籽蛋白,因此对其深加工研究具有重要的意义。通过碱提酸沉的方法来提取菜籽蛋白,分离冷冻干燥得到的菜籽蛋白利用碱性蛋白酶进行酶解,随后使用3000Da超滤管和SephadexG-15葡聚糖凝胶对制备得到的菜籽蛋白肽进行分离纯化,冷冻干燥制备的菜籽蛋白肽根据不同浓度进行抗氧化性研究,并测其血常规。试验获得主要结果如下:  (1)菜籽蛋白的制备:研究了pH值、提取时间、溶液料液比和提取温度作为单因素对菜籽蛋白提取的影响,进一步设计正交试验优化了提取工艺。结果表明:当提取pH值为12、提取时间为1h、溶液料液比为1:15、温度为50℃时,菜籽蛋白提取率为54.77%,纯度为91.77%。氨基酸检测结果表明菜籽蛋白的营养价值较高,含有人体七种必需氨基酸,占菜籽蛋白总氨基酸的29.41%。  (2)菜籽蛋白肽的制备:研究了 pH值、底物浓度、提取温度、提取时间和酶用量作为单因素对菜籽蛋白提取的影响,根据单因素对试验影响主次进一步设计正交试验优化了提取工艺。菜籽蛋白肽提取率为实验标准,优化菜籽蛋白肽提取的工艺流程。试验结果表明:pH值为10.5、底物浓度为3%、提取温度为50℃、提取时间为3h、酶用量3600U/g,菜籽蛋白肽得率为56.87%。而SephadexG-15葡聚糖凝胶对菜籽蛋白肽分离出四种不同相对分子量的肽为八肽、五肽、四肽和三肽分子质量范围为756-783、546-560、425-440和307-329Da。  (3)菜籽蛋白肽抗氧化性研究:体外抗氧化性试验表明,菜籽蛋白肽有较强的还原能力,对超氧阴离子和抑制羟基自由基有着较好的清除能力,体外抗氧化能力随着这菜籽蛋白肽浓度的增加而增强,呈现一定的量效性。体内空氧化性表明,对实验小鼠进行灌胃菜籽蛋白肽100、200、400mg/kg·d30天,发现菜籽蛋白肽可以提升小鼠的抗氧化能力,使小鼠肝脏内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)活性提高,以及减少丙二醛(MDA)含量并且具有显著影响。在血常规检测中血红蛋白、红细胞、白细胞总数、血小板总数均在正常范围内,血小板总数雄鼠的中剂量组与高剂量组、空白组三者之间均具有极显著性(P<0.01),白细胞总数雌鼠高剂量组与空白组之间具有显著性(P<0.05)。
其他文献
目前食品安全问题已逐渐成为社会关注的焦点,其中农药残留、兽药残留、毒素等有毒有害物质的检测方法研究是对食品安全进行监督管理的技术保障。动物饲养过程中,雌激素类物质经常被添加入饲料中,用于提高动物性产品的产量和质量,缩短动物的生长周期,提高生产效率。17β-雌二醇(17β-estradiol,17β-E2)作为环境雌激素中活性最强的物质之一,普遍存在于环境和动物源性食品中,若长期通过食物链在人体中富