论文部分内容阅读
目的观察司来吉兰(selegiline)对帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠胃窦、结肠酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)、神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,n NOS)和α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)表达的影响,探讨司来吉兰对PD胃、肠功能障碍治疗的作用及可能机制。方法1实验动物分组将72只健康雄性SD实验大鼠随机分为正常对照组(对照组)、PD模型组(模型组)和司来吉兰治疗组(司来吉兰组),每组又随机分为4d、8 d两个亚组,每组各12只大鼠。2帕金森病模型大鼠制备将葵花油与鱼藤酮充分混匀震荡,使其配置成2mg/ml的鱼藤酮葵花油乳化液,后两组大鼠采用颈背部皮下注射鱼藤酮制备PD模型,仔细观察并详细记录给鱼藤酮后实验大鼠的行为学变化。发生行为学计分后即中止给药。参照帕金森病大鼠模型行为学评分标准进行行为学检测,选取2-6分实验大鼠作为PD模型。3给药方法对照组:每日颈背部皮下注射葵花油2mg/kg,待模型制备成功后停止皮下注射,并灌胃给等体积生理盐水直至时间点。模型组:在大鼠颈背部每日皮下注射鱼藤酮葵花油乳液2mg/kg,待模型制备成功后停止皮下注射,并予等体积生理盐水灌胃直至时间点。司来吉兰组:模型制备成功后,每日予司来吉兰0.5mg/kg灌胃,根据亚组分组情况分别连续给药4 d或8 d。4胃固体食物残留率和1 h粪便排出量及含水率测定每组大鼠分别于治疗后4 d、8 d测定胃固体食物残留率和1 h粪便排出量及含水率。5应用免疫组织化学染色和Western blot法,分别检测各组大鼠胃窦、结肠TH、n NOS、和ɑ-Syn的表达变化情况。6组织切片采用OLYMPUS摄像显微镜(400×)摄像,并应用Motic Med 6.0数码医学图像分析系统进行分析,Western blot结果用Image J分析。7采用SPSS19.0统计软件包进行数据处理,计量资料以均数±标准差表示。数据做正态性W检验和方差齐性Levene检验,采用随机区组设计方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果1与对照组比较,模型组大鼠各时间点胃内固体食物残留率显著高于对照组(均P<0.01);与模型组相比较,治疗组大鼠各时间点胃内固体食物残留率显著低于模型组(P<0.05或P<0.01);与治疗4 d组相比较,治疗8 d组大鼠胃内固体食物残留率显著低于治疗4 d组(P<0.05)。2与对照组比较,模型组大鼠各时间点1h粪便排出量及含水率均低于对照组(均P<0.01);与模型组比较,治疗组大鼠各时间点1 h粪便排出量及含水率均高于模型组(P<0.05),与治疗4 d亚组相比较,治疗8 d亚组大鼠1 h粪便排出量及含水率高于治疗4 d亚组(P<0.05)。3与对照组比较,模型组各时间点胃窦、结肠TH表达均明显减少,n NOS、α-Syn表达均明显增加,有显著性差异(均P<0.01)。与模型组比较,治疗组各时间点胃窦、结肠TH表达均明显增多,n NOS、α-Syn表达均明显减少,均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。与治疗4 d组比较,治疗8 d组大鼠时间点胃窦、结肠TH表达均升高(P<0.05),n NOS、α-Syn表达降低(P<0.05)。结论1帕金森病模型大鼠胃窦、结肠TH表达均减少,n NOS、α-Syn表达均增多,TH、n NOS和α-Syn参与了帕金森病胃肠功能障碍的发病过程。2司来吉兰可改善PD大鼠胃肠功能障碍,其作用机制可能与其减轻PD模型大鼠胃肠多巴胺能神经元的损伤和抑制n NOS、α-Syn表达有关,且随着时间的延长,作用更明显。